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當(dāng)前位置:北京悅昌行科技有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>生物顯微鏡的保養(yǎng)及使用
中儀光科作為徠卡顯微鏡在中國地區(qū)的經(jīng)銷商,為北京顯微鏡購買者提供zui的服務(wù).
一,、生物顯微鏡的使用
(一)使用環(huán)境與工作習(xí)慣
1、使用環(huán)境
顯微鏡的工作場所應(yīng)當(dāng)清潔,、干燥,、無震動(dòng)、無腐蝕性氣體存在。
2,、工作習(xí)慣
(1)臺(tái)面和凳子的高度要適當(dāng),。
(2)鏡檢時(shí),即便用單目顯微鏡,,也須兩眼同時(shí)睜開,,用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄,。如一只眼睜,,一只眼閉,眼睛容易疲勞,,無法久看,。工作時(shí)間較長時(shí),可兩眼輪流觀察,。
(二)使用前的準(zhǔn)備
1,、光學(xué)系統(tǒng)的安裝
對(duì)新購或已經(jīng)卸掉光學(xué)系統(tǒng)的顯微鏡,使用前必須先將顯微鏡安裝起來,。安裝時(shí),,為了防止向下掉灰塵,應(yīng)按照先上后下的順序,,即按照目鏡,、物鏡、聚光鏡,、反射鏡的順序來安裝,。圖10-3-1為顯微鏡的安裝圖。箭頭所示為光學(xué)元件的安裝位置,。
安裝物鏡時(shí),,應(yīng)先將鏡筒升高或載波物臺(tái)下降,使轉(zhuǎn)換器與載物臺(tái)之間保持一定的距離,。然后,,握往物鏡,把它放入轉(zhuǎn)換器的螺絲口處,,先略向反時(shí)針方向旋轉(zhuǎn),,待物鏡配上絲紋后,再按順時(shí)針方向旋入,,旋至中等程度松緊即可,。安裝物鏡時(shí),應(yīng)根據(jù)物鏡的放大倍數(shù),,從小到大順時(shí)針安裝,。轉(zhuǎn)換物鏡時(shí),不要用手推著物鏡旋轉(zhuǎn),那樣會(huì)使物鏡的光軸歪斜,。用手捏著轉(zhuǎn)換器的轉(zhuǎn)動(dòng)盤旋轉(zhuǎn),,或用手扶著與物鏡轉(zhuǎn)換器銜接處的滾花外圓旋轉(zhuǎn)。
目鏡和物鏡裝好后,,再將聚光鏡插入載物臺(tái)下面的聚光器支架內(nèi),。插入的高度應(yīng)使聚光器升至zui高時(shí),聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺(tái)的平面,,以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后,,將聚光器的固定螺絲旋緊,。對(duì)非電光源的顯微鏡來說,zui后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內(nèi),。
2,、校正光軸
校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡,、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點(diǎn)重合在一條直線上,。所以又叫做合軸調(diào)節(jié)或中心調(diào)節(jié)。如果光軸歪斜,,會(huì)使像差增大,,分辨率和清晰度都要下降。
檢查方法是將可變光欄開至zui大,,把低倍物鏡旋入光軸,,降低鏡筒,使物鏡與載物臺(tái)之間的距離小于該物鏡的工作距離(5mm以下),。不放標(biāo)本,,調(diào)節(jié)反射鏡的角度,使視場zui亮,;或調(diào)節(jié)光源燈的亮度,,使視場明暗合適。
然后,,拔掉目鏡,,直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數(shù)次,,當(dāng)光欄關(guān)至zui小時(shí),,光欄的像(此時(shí)只有一點(diǎn)點(diǎn))應(yīng)正好落在物鏡通光孔的中心。當(dāng)光欄開大到一定程度時(shí),,光欄孔的像應(yīng)正好與物鏡通光孔的黑圈相重合,。若符合上述兩個(gè)條件,說明它們“合軸”。否則,,就需要調(diào)整,。
目鏡和物鏡都是固定的,無法進(jìn)行調(diào)整,。合軸調(diào)節(jié)主要是調(diào)整聚光鏡的位置,。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個(gè)光軸校正螺絲,調(diào)節(jié)這兩個(gè)螺絲,,即可合軸,。另一種聚光器是由框架上三個(gè)相隔120°的螺絲支持住,其中一個(gè)裝有彈簧,,可以伸縮,;另外兩個(gè)螺絲,可以旋動(dòng),。調(diào)整這兩個(gè)螺絲,,便可合軸。
顯微鏡的光軸校正好后,,如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因,,不必經(jīng)常校正。
3,、準(zhǔn)備好標(biāo)本
準(zhǔn)備好高質(zhì)量的標(biāo)本備用,。
(三)反射鏡、聚光器的使用方法和對(duì)光方法1,、調(diào)光
對(duì)采用反射鏡的的顯微鏡,,一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時(shí),,才使用凹面反射鏡,。
采用電光源的顯微鏡,將光亮調(diào)合適即行,。
2,、聚光器的用法
(1)聚光器高度的調(diào)節(jié)一般的聚光鏡,在平行光照射的情況下,,其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處,。當(dāng)使用高倍鏡或油鏡時(shí),由于放大率大,,鏡像亮度小,,需要較強(qiáng)的照明。因此,,應(yīng)把聚光器升至zui高,,以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標(biāo)本平面上,。但在使用低倍物鏡時(shí),可將聚光器適當(dāng)下降,。
(2)可變光欄的用法可變光欄起兩個(gè)作用,。一是控制射向標(biāo)本的光通量;二是改變聚光器的數(shù)值孔徑,。在這兩個(gè)作用中,,后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,,從原則上說,,聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同。否則,,分辨率或清晰度會(huì)受影響,。
3、對(duì)光方法
對(duì)電光源顯微鏡來說,,使用時(shí),只要將光調(diào)節(jié)在合適的亮度即行,。不需要進(jìn)行對(duì)光,。但對(duì)使用自然光的低檔顯微鏡來說,要想獲得良好的觀察效果,,必須充分利用照明光線,。因此,鏡檢之前應(yīng)先對(duì)光,。對(duì)光時(shí),,將低倍鏡旋入光軸,聚光器適當(dāng)升高,,可變光欄開至zui大,。然后,從目鏡中觀察,,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反射鏡,,直至視場zui明亮、清晰為止,。如果利用自然光,,則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。
(四)物鏡的正確調(diào)焦
對(duì)光完成后或調(diào)節(jié)合適光亮后,,升高鏡筒或降低載物臺(tái),,將標(biāo)本玻片夾在移動(dòng)器即標(biāo)本夾上,并將欲檢查的部分移至載物臺(tái)通光孔的中央,,然后開始調(diào)焦,。
無論作何種檢查,,均應(yīng)從低倍鏡開始。調(diào)焦時(shí),,先用粗動(dòng)手輪將鏡筒下降,,使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上,,可從側(cè)面窺視,。然后,一邊從目鏡中觀察視野,,一邊利用粗動(dòng)手輪將鏡筒徐徐上升,,待初見物像后,改用微動(dòng)手輪作精細(xì)調(diào)焦,,直至物像zui清晰為至,。低倍物鏡的視場大,有利于觀察標(biāo)本的全貌,。也可利用移動(dòng)器或縱,、橫向調(diào)節(jié)手輪尋覓所觀察的目標(biāo)。如有必要,,可將尋得的目標(biāo)移至視場的中心,,為高倍鏡觀察作好準(zhǔn)備。
從低倍物鏡轉(zhuǎn)換為高倍物鏡時(shí),,如果物鏡是顯微鏡的原配,,所用的載玻片、蓋玻片又符合標(biāo)準(zhǔn),,一般都可以進(jìn)行“等高轉(zhuǎn)換”,。即轉(zhuǎn)換后,只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕,,即可看到清晰的圖像,。但油鏡不強(qiáng)求齊焦,先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換,,zui后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦,。
使用油鏡的方法如下:先將鏡筒升高,取下標(biāo)本玻片,,稍稍降低聚光器,,并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油(油中不應(yīng)有氣泡。如有,,可用小木簽除去),,再將標(biāo)本玻片放回原處,把聚光器升高,,使載玻片的底面與香柏油接觸,。這樣,,就完成了聚光鏡的油浸。接著,,在蓋玻片上滴上1滴香柏油,。然后從側(cè)面窺視,利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降,,直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中(但尚未接觸玻片),,這樣,又完成了物鏡的油浸,。然后,,一邊從目鏡中觀察,一邊利用微動(dòng)手輪將鏡筒緩緩上升(注意不要擰錯(cuò)了方向,,壓碎蓋玻片),,直至視野中出現(xiàn)zui清晰的物像為止。
聚光鏡的油浸,,還可以采用另一種滴油方法:即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,,而是把載玻片翻過來,將油滴在載玻片的底面上,,然后再翻過去,,對(duì)準(zhǔn)放置于聚光器上面,再使聚光器上升,,來完成聚光器的油浸,。這種方法雖然不那么順手,,但比較安全,。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油,這種方法容易劃傷鏡片,,不宜采用,。
在使用油鏡時(shí),允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油,,即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì),,但這會(huì)犧牲物鏡的分辨率。
如用油鏡觀察后,,如又需要轉(zhuǎn)回高倍物鏡觀察,,應(yīng)將蓋玻片上的油擦去,以免沾污高倍物鏡,。但聚光器上的油可以不擦,,只要把光欄適當(dāng)縮小一點(diǎn)即可。
油鏡使用完畢后,,要及時(shí)將香柏油擦拭干凈,。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1~2次,,把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次,,zui后用擦鏡紙擦干凈即行,。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存,,玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈,。即將擦鏡紙復(fù)蓋在玻片上,在紙上滴上一滴二甲苯,,趁濕將紙條平拖著往外拉,,連續(xù)幾次即可擦干凈。
zui后指出:在整個(gè)調(diào)焦過程中(尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦),,每個(gè)動(dòng)作都要緩慢進(jìn)行,。否則,物像會(huì)一閃而過,,找不到觀察的目標(biāo),。
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