 |
上海源葉生物科技有限公司
主營產品： S30260異硫氰酸胍,30259鹽酸胍,嗜熱菌蛋白酶 |
聯(lián)系電話
15921386130
公司信息
- 聯(lián)系人：
- 何小姐
- 電話：
- 86-021-61559134
- 手機：
- 15921386130
- 傳真：
- 86-021-55068248
- 地址：
- 上海市松江區(qū)長塔路465號6幢
- 郵編：
- 200433
- 網址：
- www.shyuanye.com
瘋牛病IDEXXEIA檢測方法
2011-7-6 閱讀(900)
本方法（IDEXX HerdChek BSE EIA test）由美國IDEXX公司開發(fā)研制,，是一種快速簡捷的酶聯(lián)免疫測定方法,，2004年通過美國和歐盟認證,。
該方法的原理是將牛腦組織制成勻漿懸液，用稀釋液處理組織懸液,，將處理后的腦組織懸液加入到包被有能選擇性地捕獲PrPSc的化學聚合物（英國Microsens公司技術）的微孔板中,，室溫孵育，洗滌后加入辣根過氧化物酶標記的針對PrP分子保守區(qū)的單抗,，TMB顯色,，測定OD值，判斷結果,。
本方法的敏感性為100％,，特異性為99．99％。本方法的特點在于不需要蛋白酶K消化,，無需離心,，無需特別溫度的孵育，所有步驟都在室溫下進行,，4．5h內出結果,，無需豐富的實驗經驗,，實驗廢物少，所需實驗空間小,。
瘋牛病的IDEXXEIA檢測方法主要步驟如下,。
（1）樣品準備 收集樣品（腦閂部組織），勻漿,，用稀釋液稀釋勻漿液,。
（2）捕獲PrPSc將稀釋好的勻漿液加入到BSE病原捕獲板中，由seprion親和配體捕獲,。
（3）添加調節(jié)緩沖液 洗去捕獲板中未結合的樣品,，加入調節(jié)緩沖液并孵育，使捕獲的PrPSc變性,，以便充分暴露抗原位點,。
（4）添加HRP標記的單抗 洗去調節(jié)緩沖液，加入HRP標記的單抗并孵育,。標記了HRP的PrP單抗結合上PrPSc,。
（5）添加底物和終止液 洗去未結合的單抗，加入底物并孵育,。當有陽性時出現(xiàn)藍色,，滴加HCl終止液終止反應，顏色則變成了黃色,。
（6）讀值和分析 用酶標儀讀板,，數(shù)值用IDEXXxChek軟件分析。
