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上海源葉生物科技有限公司
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瘋牛病PrioSTRIP試紙條檢測法
2011-7-6 閱讀(750)
本方法(Prionics-check PrioSTRIP)由瑞士PrionicsAG公司開發(fā)研制,,是一種快速簡單的試紙條式免疫色譜檢測方法,,2004年通過歐盟認證,。該方法的原理是制備腦組織勻漿,,用蛋白酶K處理,然后與標記有PrP單克隆抗體的乳膠顆粒孵育,,zui后用試紙條直接檢測孵育后的溶液,。根據(jù)試紙條上出現(xiàn)的顏色條帶來判定實驗結(jié)果。
本方法的敏感性和特異性均為100%,,整個反應在3h內(nèi)可以完成,。
瘋牛病PrioSTRIP試紙條檢測法的主要步驟如下。
(1)樣品準備 取腦閂部組織,,勻漿,,然后將勻漿液加入到96孔分析板中。
(2)消化 往分析板中加入PK酶消化液,,使正常的PrP蛋白質(zhì)*消化掉,,而瘋牛病病原則保留下來。
(3)孵育 將消化完的樣品轉(zhuǎn)移到檢測板,,加入PrP抗體,,該抗體結(jié)合有藍色乳膠顆粒。
(4)檢測 將梳形試紙條插入檢測板中的液體里,,待20min,。
(5)分析結(jié)果 在陽性對照出現(xiàn)正常結(jié)果的情況下,如果試紙條出現(xiàn)一個條帶,,則該樣品為瘋牛病陰性,,如果出現(xiàn)兩個條帶則該樣品為BSE陽性。實驗結(jié)果也可用的儀器讀數(shù)并分析,。