1. 器材：
剪刀（剪兔毛用）一把,、彎頭眼科手術鑷子（游離血管用）一把,、直頭眼科手術剪（剪血管用）一把，手術刀架,，手術刀片,，注射器（1ml、10ml,，25ml）附針頭,，兔子固定架，滅菌三角燒瓶（200ml）或平皿（直徑18cm）,、彎頭止血鉗四把,，直頭止血鉗兩把，手術縫合線,，塑料放血管,，紗布等。
2. 試劑：
生理鹽水（或PBS），
弗氏*佐劑（Freund’s complete adjuvant, FCA） Sigma F-5881,，
弗氏不*佐劑（Freund’s incomplete adjuvant, FIA） Sigma F-5506,，
二甲苯，酒精棉,，脫脂棉,，2% NaN3
3. 兔子的選擇：
兔子的重量應在四斤以上，兩耳光滑,，明顯可見耳靜,、動脈，健康,。
4. Pre-bleeding：
抗原注射以前需要收集一些正常血清,，已備檢測抗體時作為陰性對照。待兔子在新環(huán)境中穩(wěn)定,，大概需要四天左右時間,，可以進行耳動脈取血。取血量約5ml足矣,。
免疫用的抗原必須純化,，否則影響抗體的質量?？乖汧CA或FIA充分乳化后才能注射,。將抗原液與佐劑等比例混合后，置于混合器上使之劇烈振蕩使抗原充分乳化,，乳化過程比較費時,、費力，但若乳化不充分,，會影響免疫的效果,，振蕩后，1000rpm離心一分鐘,，如水相和油相不分層即可注射。免疫用FCA,，以后都用FIA,。
免疫方法可采用背部多點注射法。即于家兔脊柱兩旁選4-6點皮下注射,，每點注0.1ml,，間隔2周后再于上述部位選不同點注射（不要選擇臨近位點，否則潰瘍愈合不好）,。每次免疫的抗原量約100μg,。免疫次數在四五次即可，抗原用量大可以減少次數。
免疫一周后,，可以耳動脈取血檢測抗體效價,。因為起初幾次免疫產生的抗體的效價比較低，頭兩次取血,，夠檢測用即可,。在三次免疫后，可以獲得較價的抗體,，每次取血量可以在40ml,，不要取太多，否則會造成兔子貧血,。zui后一次取血可以采用頸動脈放血,，具體操作如下：
a.家兔仰臥于兔架上固定頭部，用紗布固定四肢,。頭部略放低以暴露頸部,。剃毛并消毒皮膚；
b.沿頸部中線用手術刀切開皮膚約10cm,，分離皮下結締組織,，直至暴露出氣管兩側的胸鎖乳突肌（小心操作,，如碰到小血管出血,，可用止血鉗止血）
c.用直頭止血鉗分離胸鎖乳突肌與氣管間的頸三角區(qū)疏松組織，暴露出頸總動脈后用彎頭眼科鑷使之游離,，剝離神經和結締組織,；
d.于動脈下套入兩根黑絲線，分別置于遠心及近心端,。結扎遠心端的絲線,。近心端的動脈用血管夾夾住,；
e.用小拇指墊在血管下,，用尖頭眼科手術剪在兩根絲線間的動脈璧上剪一小口（勿剪斷），插入塑料放血管,。再將近心端的絲線結扎固定于放血管上,，以防放血管滑脫；
f.松開止血鉗,，使血液流入容器中,。一般一只家兔可放血100-120ml。
5. 血清的分離：
如果用三角瓶或平皿盛血,，將器皿傾斜放置于37oC烘箱2hr,，轉移到4oC沉淀過夜,，第二天早上用吸管吸取血清。如果用離心管收集,，37oC烘箱放置2hr,，轉移到4oC沉淀過夜，第二天早上離心,，10000RCF,，10分鐘。在血清中加入 NaN3 至終濃度0.02%,，分裝后-20oC保存,。