IL-17是新近被確認(rèn)的一種細(xì)胞因子,，由T細(xì)胞,，主要是CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生,，其靶細(xì)胞廣泛,。可激活轉(zhuǎn)錄因子NF-KB,，誘導(dǎo)纖維母細(xì)胞產(chǎn)生IL-6,、ID8、GM-CSF,、和膜性細(xì)胞間粘附分子1（1CAM-1）,，促進(jìn)由亞適劑量PHA所誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖,。目前編碼IL-17及其受體的基因核苷酸序列已被部分測(cè)定,。

（1）IL-17的誘導(dǎo)：取人PBMC或純化的CD4+T細(xì)胞,，加入誘導(dǎo)劑（PMA 5ng／mL+ionomycin 3ug／mL,，或ConA 63ug／mL,，或抗CD28抗體+CD3抗體）,，37℃孵育48—72h,。收集培養(yǎng)上清液檢測(cè)IL-17含量（ELISA法）或生物學(xué)活性,。

（2）IL-17生物學(xué)活性檢測(cè)：通過(guò)誘導(dǎo)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞或腎癌上皮細(xì)胞株（TUMT或CHA）產(chǎn)生IL-6、IL-8或GM-CSF可以檢測(cè)IL-17的活性,。

1）滑膜細(xì)胞的制備：外科切取關(guān)節(jié)滑膜,，剪碎后用4ug／mL膠原酶消化,，37~C孵育2～3h，單個(gè)細(xì)胞懸液用培養(yǎng)液培養(yǎng),。細(xì)胞貼壁后,，洗去未粘附細(xì)胞。待細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合,，用胰蛋白酶消化傳代,。一般采用3—8代的滑膜成纖維樣細(xì)胞作為檢測(cè)用靶細(xì)胞。

2）取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,，每孔依次加人104滑膜細(xì)胞或是TUMT細(xì)胞（或CHA細(xì)胞）,，不同稀釋度的IL-17待測(cè)樣品，總體積為200uL,，置370（2 5％C02溫箱中孵育48h，收集上清,，置-20℃保存以備檢測(cè)細(xì)胞因子活性。用ELISA法或生物學(xué)活性測(cè)定法檢測(cè)上清液中的II-6、IL-8或GM-CSF等細(xì)胞因子的含量或活性，以此推測(cè)IL-17的活性