您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
顯微鏡的幾種觀(guān)察模式
一．明視野觀(guān)察
明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式,，廣泛應(yīng)用于病理、檢驗(yàn),，用于觀(guān)察被染色的切片,，所有顯微鏡均能完成此功能。
二．暗視野觀(guān)察
暗視野實(shí)際是暗場(chǎng)照明發(fā),。它的特點(diǎn)和明視野不同,，不直接觀(guān)察到照明的光線(xiàn)，而觀(guān)察到的是被檢物體反射或衍射的光線(xiàn),。因此,，視場(chǎng)成為黑暗的背景,，而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的象。
暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象,，微塵在強(qiáng)光直射通過(guò)的情況下,，人眼不能觀(guān)察，這是因?yàn)閺?qiáng)光繞射造成的,。若把光線(xiàn)斜射它,，由于光的反射，微粒似乎增大了體積,，為人眼可見(jiàn),。
三．相差鏡檢法
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中，相差鏡檢術(shù)的發(fā)明成功,，是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就,。我們知道，人眼只能區(qū)分光波的波長(zhǎng)（顏色）和振幅（亮度）,，對(duì)于無(wú)色通明的生物標(biāo)本,，當(dāng)光線(xiàn)通過(guò)時(shí)，波長(zhǎng)和振幅變化不大,，在明場(chǎng)觀(guān)察時(shí)很難觀(guān)察到標(biāo)本.
相差顯微鏡的基本原理是,，把透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對(duì)比度,，使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見(jiàn),。光線(xiàn)透過(guò)標(biāo)本后發(fā)生折射，偏離了原來(lái)的光路,，同時(shí)被延遲了1/4λ（波長(zhǎng)）,，如果再增加或減少1/4λ，則光程差變?yōu)?/2λ,，兩束光合軸后干涉加強(qiáng),，振幅增大或減下，提高反差,。在構(gòu)造上,，相差顯微鏡有不同于普通光學(xué)顯微鏡兩個(gè)特殊之處：
1.環(huán)形光闌位于光源與聚光器之間，作用是使透過(guò)聚光器的光線(xiàn)形成空心光錐,，焦聚到標(biāo)本上,。
2.相位板在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ,。分為兩種：
1.A+相板：將直射光推遲1/4λ,，兩組光波合軸后光波相加，振幅加大，標(biāo)本結(jié)構(gòu)比周?chē)橘|(zhì)更加變亮,，形成亮反差（或稱(chēng)負(fù)反差）,。
2.B+相板：將衍射光推遲1/4λ，兩組光線(xiàn)合軸后光波相減,，振幅變小,，形成暗反差（或稱(chēng)正反差），結(jié)構(gòu)比周?chē)橘|(zhì)更加變暗
四．微分干涉稱(chēng)鏡檢術(shù)
微分干涉鏡檢術(shù)出現(xiàn)于60年代,，它不僅能觀(guān)察無(wú)色透明的物體,，而且圖象呈現(xiàn)出浮雕壯的立體感，并具有相襯鏡檢術(shù)所不能達(dá)到的某些優(yōu)點(diǎn),，觀(guān)察效果更為逼真,。
微分干涉稱(chēng)鏡檢術(shù)是利用特制的渥拉斯頓棱鏡來(lái)分解光束。分裂出來(lái)的光束的振動(dòng)方向相互垂直且強(qiáng)度相等,，光束分別在距離很近的兩點(diǎn)上通過(guò)被檢物體,，在相位上略有差別。由于兩光束的裂距極小,，而不出現(xiàn)重影現(xiàn)象,，使圖象呈現(xiàn)出立體的三維感覺(jué)。
五.偏光顯微鏡
偏光顯微鏡的特點(diǎn)：偏光顯微鏡是鑒定物質(zhì)細(xì)微結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的一種顯微鏡,。凡具有雙折射的物質(zhì)，在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚,，當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色發(fā)來(lái)進(jìn)行觀(guān)察,，但有些則不可能，而必須利用偏光顯微鏡,。雙折射性是晶體的基本特性,。因此，偏光顯微鏡被廣泛地應(yīng)用在礦物,，化學(xué)等領(lǐng)域,。在生物學(xué)和植物學(xué)也有應(yīng)用。
六.浮雕相襯顯微鏡
1975年,，RobertHoffman博士發(fā)明
2002年,，到期，各顯微鏡廠(chǎng)家紛紛推出采用以自己名義命名的RC技術(shù)產(chǎn)品
原理：斜射光照射到標(biāo)本產(chǎn)生折射,、衍射,，光線(xiàn)通過(guò)物鏡光密度梯度調(diào)節(jié)器產(chǎn)生不同陰影，從而使透明標(biāo)本表面產(chǎn)生明暗差異,，增加觀(guān)察對(duì)比度
特點(diǎn)：提高未染色標(biāo)本的可見(jiàn)性和對(duì)比度,；圖象顯示陰影或近似三維結(jié)構(gòu)而不會(huì)產(chǎn)生光暈；可檢測(cè)雙折射物質(zhì)（巖石切片、水晶,、骨頭）,；可檢測(cè)玻璃,塑料等培養(yǎng)皿中的細(xì)胞,器官和組織；聚光鏡的工作距離可以設(shè)計(jì)的更長(zhǎng),；RC物鏡也可用于明場(chǎng),暗場(chǎng)和熒光觀(guān)察
七：熒光顯微鏡熒光鏡檢術(shù)是用短波長(zhǎng)的光線(xiàn)照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體,，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光，然后觀(guān)察,。
優(yōu)點(diǎn)：
•檢出能力高（放大作用）
•對(duì)細(xì)胞的刺激?。梢曰铙w染色）
•能進(jìn)行多重染色
用途：
•物體構(gòu)造的觀(guān)察——熒光素
•熒光的有無(wú)、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別——抗體熒光等
•發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性,、定量分析