色譜分離條件優(yōu)化
一. 減小柱內(nèi)展寬,提高柱效
1,、流動(dòng)相:選用低粘度的流動(dòng)相,有利于增大組分在溶劑中的擴(kuò)散系數(shù)Dm,減少傳質(zhì)阻力,。
2,、固定相:①粒度小,均勻,,以減小渦流擴(kuò)散和流動(dòng)相傳質(zhì)阻力,;②改進(jìn)結(jié)構(gòu),盡可能采用大孔徑和淺孔道的表面多孔型載體或全多孔微粒型載體,,減少滯留流動(dòng)相傳質(zhì)阻力,。
3、流速:從H-U曲線可知,,HPLC的*流速在流速很小處,,減少流速有利于提高柱效,但在實(shí)踐中為加快分析速度,,常采用比*流速高數(shù)倍的流速,。
4、柱溫:適當(dāng)提高柱溫,,可降低流動(dòng)相粘度,,減少傳質(zhì)阻力,但柱溫升高將使分辨率降低,,柱壽命短,,易產(chǎn)生氣泡,一般在室溫下進(jìn)行,。
二. 柱外展寬
柱外譜帶展寬又稱“柱外效應(yīng)”,,系指從進(jìn)樣點(diǎn)到檢測(cè)池之間除柱子本身以外的所有死體積所引起的色譜峰展寬,柱效下降,??煞譃椋?br /> 1、柱前展寬 主要由進(jìn)樣引起,,減小進(jìn)樣器的死體積,,用閥門(mén)進(jìn)樣可減少柱前譜帶展寬,提高柱效,。
2,、柱后展寬 主要由接管、檢測(cè)器流通池體積及檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間等因素所引起,。因此,,盡可能用短而內(nèi)徑細(xì)的接管,減少流通池體積,,改進(jìn)檢測(cè)器和記錄系統(tǒng)的響應(yīng)速度等都是克服柱后展寬的途徑,。