液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱、檢測器,、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,，被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對運(yùn)動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時,，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。液相色譜法只要求樣品能制成溶液,，不受樣品揮發(fā)性的限制,，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多,，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的,、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。

液相色譜儀色譜特點(diǎn)：

高壓--壓力可達(dá)150～300 kg/cm2,。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上,。

高速--流速為0.1～10.0 mL/min。

--塔板數(shù)可達(dá)5000/米,。在一根柱中同時分離成份可達(dá)100種,。

高靈敏度--紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時消耗樣品少,。

HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn)：

速度快-通常分析一個樣品在15～30 min,，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。

分辨率高--可選擇固定相和流動相以達(dá)到*分離效果,。

靈敏度高--紫外檢測器可達(dá)0.01ng,，熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。

色譜柱可反復(fù)使用--用一根色譜柱可分離不同的化合物,。

樣品量少,，容易回收--樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備,。

液相色譜儀具體應(yīng)用：

液相色譜法只要求樣品能制成溶液,，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動相可選擇的范圍寬,，固定相的種類繁多,，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。

與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,，HPLC 所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,，能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分,。隨著固定相的發(fā)展，有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。

HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法,。由于HPLC具有高分辨率,、高靈敏度、速度快,、色譜柱可反復(fù)利用,，流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué),、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析,、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域,。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。

液相色譜- 質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,，如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等,； 液相色譜- 紅外光譜連用也發(fā)展很快，如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,，海水中的不揮發(fā)烴類,，使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

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