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初級(jí)會(huì)員 | 第14年

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色譜柱操作的注意要點(diǎn)

時(shí)間:2012/10/26閱讀:420
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色譜柱使用和維護(hù)注意事項(xiàng) 
 色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱,。
  ① 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況,;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩(如前所述),。  
   ② 應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧? 
  ?、邸∫话阏f來色譜柱不能反沖,,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會(huì)迅速降低柱效,。  
    ④ 選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),,以避免固定相被破壞,。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),,預(yù)柱為硅膠,,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。
 ?、荨”苊鈱⒒|(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱,。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱,。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。  
     ⑥ 經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時(shí),,對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml,。

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