1.氣相色譜中的幾個概念：

氣相色譜：

以氣體為流動相，依據(jù)組分與固定相之間分配吸附等作用力的差異而實現(xiàn)復(fù)雜樣品分離的一種分離技術(shù),。分離對象是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定，沸點一般不超過500度的樣品,。

氣體：

載氣——用于傳送樣品通過整個系統(tǒng)的氣體。

檢測器氣體——某些檢測器所需的支持氣體,，如,，F(xiàn)ID。

樣品引入：

將樣品蒸汽引入載氣的過程,。該過程應(yīng)對樣品蒸汽有zui小影響,。

色譜柱：

實現(xiàn)樣品組分的分離。

檢測器：

對流出柱的樣品組分進行識別和響應(yīng),。

數(shù)據(jù)采集：

將檢測器的信號轉(zhuǎn)換為色譜圖,，以備手動或自動定性、定量分析之用,。

2.氣路中為什么要用氣體捕集阱,；GC中zui常用有哪幾類捕集阱？

GC載氣中的常見的污染物有水分,，氧氣,，烴類化合物和鹵代烴，其對色譜柱的壽命及被分析物的檢測有很大影響,，不良的影響包括：

水分：

是色譜柱固定相降解的常見原因,；可以損壞儀器,；

氧氣：

zui常見的污染物；是色譜柱固定相降解和進樣口襯管性能下降的常見原因,；可引起不穩(wěn)定被分析物的分解,；

烴類化合物和鹵代烴：

通過增加檢測器背景噪音而降低檢測器靈敏度；還可引起基線漂移或波動,、污染物色譜峰,、噪音或高的基線補償。

水分,，氧氣,，烴類捕集阱是GC中zui常用的捕集阱。

3.不同的檢測器應(yīng)該分別配什么樣的捕集阱,？

FID,、NPD、FPD－空氣,，尾吹氣,，氫氣→烴類捕集阱（如，5060-9096）

FID,、NPD,、FPD、TCD－載氣→水分,、氧氣捕集阱(如,，OT3-2)

ECD－尾吹氣→水分和氧氣捕集阱（如，OT3-2）

TCD－參比氣→烴類捕集阱（如,，5060-9096）

MSD－氦氣,，甲烷→除水分、氧氣,、烴類的組合捕集阱(如,，RMSH-2)和氧氣指示捕集阱（如，IOT-2-HP）

以上捕集阱建議6～12個月?lián)Q一次,，具體看顧客的使用頻率,。

4.在GC的進樣口端涉及的消耗品有哪些,？

注射器,、進樣墊、O型圈5188-5365,、襯管,、平流平板（鍍金密封墊）、金屬墊片5061 - 5869,、石墨密封墊,、柱螺母,。

5.為什么要更換進樣隔墊？隔墊有哪些類型,？如何根據(jù)客戶需求選擇進樣隔墊,？

隔墊需定期更換，可防止：漏氣,、分解,、樣品損失、柱流量或分流流量下降,、出鬼峰,、柱效下降。不同的隔墊有不同的性能：

流失性與溫度優(yōu)化隔墊（BOT）：5183-4757

溫度范圍寬,，低流失→適合于質(zhì)譜,，進樣口zui高溫度400度，減少在進樣口處的沾粘,。

長壽命隔墊5183-4761

預(yù)穿孔,，延長使用壽命，減少成核,；自動進樣優(yōu)選隔墊,，適合通宵運行；進樣達400次及350度高溫,。

高級綠色隔墊5183-4759

壽命長,，耐高溫；進樣次數(shù)多,；降低進樣口的粘貼,；溫度達350度。

以上三種隔墊屬高級隔墊,，經(jīng)等離子體處理,，不沾粘隔墊

通用型隔墊：

溫度350度，次數(shù)達200次,，經(jīng)濟節(jié)約型,；

6.如何選擇石墨墊與柱螺母？

首先了解石墨墊的兩種材質(zhì)：

石墨→材質(zhì)軟,，溫度上限高,。

vespel→由耐高溫的聚酰亞胺制成，材質(zhì)硬,，高溫產(chǎn)生流失,。

石墨墊與柱螺母：

短墊配短帽，長墊配長帽（如，MS接口柱螺帽05988-20066應(yīng)配預(yù)老化的85% vespel,，15%石墨墊長墊,，通用柱螺帽可配85%vespel，15%石墨墊短墊）

石墨墊的選擇（應(yīng)根據(jù)材質(zhì)及色譜柱內(nèi)徑的大?。?，更換頻率一般更換色譜柱、泄漏時就進行更換,。

7.襯管的作用是什么,，什么時候更換襯管？選擇襯管時應(yīng)考慮什么因素,？

襯管是進樣體系的中心元件,，樣品在此蒸發(fā)而成氣體。定期更換襯管主要取決于以下情況：對比以前做的譜圖,；樣品的潔凈程度,；色譜峰是否出現(xiàn)異常現(xiàn)象：出現(xiàn)鬼峰,、峰形變化,、重現(xiàn)性差、樣品高溫分解等,。

選擇襯管應(yīng)考慮的因素：進樣口類型/進樣技術(shù),、襯管體積、襯管處理或去活,、特殊性能（石英棉,、石英杯、細徑錐等）

8.為什么要使用去活化的襯管及玻璃棉,？什么物質(zhì)使用去活不帶玻璃棉的襯管,？

進樣口襯管上的活性點可以吸附樣品組分，引起色譜峰拖尾,，損失靈敏度和重現(xiàn)性,。

當不分流進樣及分析稍有極性的化合物時，應(yīng)建議用去活化的襯管,。

使用玻璃棉：

A.減少熱歧視,，為樣品*揮發(fā)提供足夠的表面積

B.捕獲非揮發(fā)組分和隔墊碎屑，使其不至于進入色譜柱

C.擦凈自注射器針頭上的樣品,，從而提高了重現(xiàn)性,，避免樣品在隔墊上的殘留。

使用去活不帶玻璃棉襯管的化合物有：酚類,、有機酸類,、農(nóng)藥類、胺類,、濫用藥物,、反應(yīng)性極性化合物、熱不穩(wěn)定化合物,。

不分流進樣模式：痕量分析,、樣品濃度低、流速低,、進樣量小,。

分流進樣模式：樣品濃度高、流速大,、進樣量大,。

9.氟代烴O型圈及石墨O型圈

氟代烴O型圈：不易變形，易更換,，多數(shù)情況下使用

石墨O型圈：易變形及剝落,，進樣口溫度高于350度時使用。

更換頻率：二者一般在更換襯管的時候也同時更換O型圈

10.如何清洗分流平板（鍍金密封墊）

A.在溶劑中超聲清洗,，烘干,；

B.用非氯硅烷化試劑去活化：HMDS（六甲基二硅烷）或BSTFA（N，O雙（*基硅烷基）fo乙xian胺）或BSA（N,O-雙(*基硅烷基)乙酰胺）或TSIM,、TSIM（N-*基硅烷咪唑）

C.用溶劑清洗,，先惰性洗滌——甲苯，再用醇類清洗——甲醇,，烘干,。

11.色譜柱有哪些柱參數(shù)？如何根據(jù)這些參數(shù)為客戶選擇色譜柱,？

色譜柱柱參數(shù)：固定相,，柱長，內(nèi)徑,，膜厚,。

固定相的選擇：相似相溶原理。

非/弱極性柱—zui常用,！中等極性柱—適用于復(fù)雜/困難的分離,；強極性柱—多用于特殊應(yīng)用。

柱長：

10～15m通常十個組分以下簡單樣品的快速分析

25～30m標準柱長滿足絕大部分應(yīng)用

50m,，60m,，100m復(fù)雜樣品的分析

內(nèi)徑：

0.53mm大口徑可替代填充柱能承受較大體積進樣，痕量分析

0.32mm寬徑,，分流/不分流進樣,，能承受較大體積進樣

0.25mm窄徑分流進樣，GC/MS 應(yīng)用，較高柱效

0.18mm微徑較快分離高柱效

0.10mm快速GC,，快速分離對儀器要求高

膜厚：

0.10um薄膜,，保留和柱容量低適用于高沸點化合物、組分密集樣品或熱敏化合物0.25~0.50um 標準膜厚應(yīng)用zui廣

1.0~10.0um 厚膜保留和柱容量高適用于低沸點揮發(fā)性化合物

厚膜有利于掩蔽活性位點但高溫下柱流失較大

12.色譜柱的溫度極限如60℃至240℃/260℃各表示什么,？

60℃—溫度下限,，低于該溫度使用柱效會降低，但不會損傷色譜柱

240℃—恒溫溫度上限,，可在此溫度長時間使用

260℃—程序升溫溫度上限,，不可超過此溫度，且在此溫度使用不得超過10分鐘

13.了解有關(guān)液相色譜柱的幾個參數(shù)及安捷倫色譜柱的分類和應(yīng)用范圍,。

表面積——顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,，以m2/gram表示；

高表面積對于多組份樣品的分離具有較強的保留能力,，柱容量和分離度,；

表面積低的填料通常能迅速達到平衡狀態(tài)，對于梯度淋洗尤為重要

孔徑——顆粒的孔或腔的平均尺寸,，范圍60-10,000Å

大孔的填料顆?？梢匝娱L溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時間，達到充分分離,，改善峰形,；樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑，樣品MW＞4000選擇300Å的孔徑

碳覆蓋率——對色譜分離的影響,，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量,。

高碳覆蓋率：提高分辨率，分析時間長,；低碳覆蓋率：縮短運行時間

封端/封尾——對色譜分離的影響,，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基（二次鍵合）

封端：減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象

對于極性樣品，未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異

粒徑——1.8um3.5um→快速分離

5um→行業(yè)標準

7um→制備柱

14.如何沖洗液相色譜柱,？

對于反相色譜柱的沖洗：

用以下溶劑至少各25mL沖洗色譜柱(分析柱)

不含緩沖鹽的流動相

100%甲醇

100%乙腈

75%乙腈+25%異丙醇

100%異丙醇

100%二氯甲烷

100%己烷

*若使用己烷或二氯甲烷沖洗色譜柱,，則在重新使用反相流動相以前，必須用異丙醇沖洗色譜柱?。,。?/p>

對于正相色譜柱的沖洗：

用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱(分析柱)

50%甲醇+50%三氯甲烷

100%乙酸乙酯

15.如何對氣相色譜柱進行老化,？

安裝色譜柱后,，首先用至少3倍于平常工作流速的載氣吹色譜柱, 然后將載氣流速調(diào)整到正常流速，開始從100度升溫迅速升溫到老化溫度,，老化色譜柱,。

老化溫度——在高于樣品分析終溫20度但不超過色譜柱的恒溫溫度上限的狀態(tài)下,，恒溫2小時的方法快速老化一支新的毛細管色譜柱，色譜柱老化時的升溫速率沒有限制,，即可使用zui高升溫速率老化色譜柱,。

16.液相色譜儀有哪些重要組成部分？液相有哪些檢測器,？

脫氣機,、泵,、柱溫箱,、自動進樣器、檢測器,。檢測器有：

VWD 可變波長紫外檢測器,、DAD二極管陣列檢測器、MWD多波長檢測器,、RID,、示差折光檢測器、FLD熒光檢測器,。

17.如何選擇溶劑入口過濾頭,？

用于常規(guī)和毛細液相的溶劑過濾頭有：玻璃過濾頭20μm孔徑(5041-2168），PTFE連接頭5mm/3.2mm（5062-8517),，不銹鋼過濾頭12-14μm孔徑（01018-60025）

用于制備液相的溶劑過濾頭有：玻璃過濾頭40μm孔徑(3150-0944）,，PTFE 連接頭7mm/4mm（G1361-23204)

若流動相涉及以下溶劑，應(yīng)避免使用不銹鋼過濾頭：碘化鋰, lv化jia,，高濃度的硝酸及硫酸,，在有機溶劑中的有機酸溶液，如甲醇中1%乙酸會腐蝕不銹鋼,，四氯化碳和異丙醇或THF混合液等,。

日常對玻璃濾芯的清洗可用35%的硝酸浸泡1小時（不用超聲波清洗，會引起破裂）

18.流通池的選擇指南

毛細管液相色譜柱(內(nèi)徑0.3或0.5mm)500nL流通池,；

微徑或溶劑節(jié)省型液相色譜柱(內(nèi)徑1.0或2.1mm)半流通池,；

傳統(tǒng)液相色譜柱(內(nèi)徑3.0或4.6mm)標準流通池反壓高于100bar，高壓流通池形,；樣品MW≤4000,，選擇80Å的孔徑，樣品MW＞4000選擇300Å的孔徑,；

碳覆蓋率——對色譜分離的影響,，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。

高碳覆蓋率：提高分辨率,，分析時間長,；低碳覆蓋率：縮短運行時間

對色譜分離的影響,，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基（二次鍵合）

封端：減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象

對于極性樣品，未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異

粒徑：1.8um3.5um→快速分離

5um→行業(yè)標準

7um→制備柱