色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要，稍有不慎就會(huì)降低柱效,，縮短使用壽命甚至損壞.在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱．
①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)．溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,，在閥進(jìn)樣時(shí)的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩,。
②應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?nbsp;
③一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),，才可以反沖除去柱內(nèi)的雜質(zhì)．否則反沖會(huì)迅速降低柱效．
④選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH）,，以避免固定相被破壞．有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠,，預(yù)柱為硅膠,，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠＂飽和＂，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解．
⑤避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱骨需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱．保護(hù)柱一般是填有固定相的短柱．保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換．
⑥經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),，在進(jìn)行清洗時(shí)，對流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,，每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,，即常規(guī)分析需要50-75ｍl。
⑦保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,，柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間,。
⑧色譜柱使用過程中,，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗,；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭被污染,；如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,，死體積增大,。
通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上,。以硅膠為基質(zhì)的填料，只能在pH2~9范圍內(nèi)使用,。柱子使用一段時(shí)間后,，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂。新的色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷,，使柱效下降,。 每次工作完后，用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗,，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡,。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí)，使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗,。含鹵族元素（氟,、氯、溴）的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,，不宜長期與之接觸,。裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用，應(yīng)每隔4~5天開機(jī)沖洗15分鐘,。
9.色譜柱的保養(yǎng)：當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時(shí),，閥件或管路一定要清洗干凈； 要注意流動(dòng)相的脫氣,；
避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相,； 進(jìn)樣樣品要提純； 嚴(yán)格控制進(jìn)樣量,；
每天分析工作結(jié)束后,，要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品； 每天分析測定結(jié)束后,，都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗?nbsp;若分析柱長期不使用,，應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉；
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