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相關知識>>>>>

多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1、制備抗原,。 　
　2,、選擇實驗動物。
　　3,、動物免疫,。 　
　4、試取血進行測試,，看看是否成功免疫,。
　　5、如果成功免疫,，殺死實驗動物,，采集全部血清。
　　6,、純化出抗體,。 　
　7、鑒定抗體,。包括純度以及特異性,。
　　抗體的功能：
　　抗體的主要功能是與抗原（包括外來的和自身的）相結合，從而有效地清除侵入機體內(nèi)的微生物,、寄生蟲等異物,，抗體（antibody）是一種應答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結合的蛋白質(zhì),。每種抗體與特定的抗原決定基結合,。這種結合可以使抗原失活，也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害,，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體,、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生,，對人體可造成危害。
單克隆抗體：
　?。╩onoclonal antibody,，McAb）克隆選擇學說：淋巴細胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結合的受體，一種細胞帶一種受體，進入機體的抗原選擇性的結合其中的個別淋巴細胞,，使之活化,，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細胞群，分泌同樣的抗體,。當抗原進入體內(nèi),，在機體中就會誘導出針對不同抗原決定簇的多種抗體，如果要把這些抗體一一分開,，用現(xiàn)有的生物化學或物理化學方法是根本辦不到的,。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細胞與腫瘤細胞融合，培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細胞,。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年，Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細胞（Plasmacytoma）,，開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術,。與鼠單抗相比，兔單抗具有：首先,，兔抗血清通常含有高親和力抗體,，可以比鼠抗血清識別更多種類的表位；其次,，兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,；第三，由于兔脾臟較大,，可以更多進行的融合試驗,，使得高通量篩選融合成為可能。
抗體結構：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結構,，其中2條較長,、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）；2條較短,、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）,。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結形成一個由4條多肽鏈構成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ,、δ、γ,、ε和α五種,。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列,?？勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈,，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū),。高變區(qū)位于分子表面，zui多由17個氨基酸殘基構成,，少則只有2 ～ 3個,。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結合抗原抗原的特異性。一個抗體分子上的兩個抗原結合部位是相同的,，位于兩臂末端稱抗原結合片段（antigen-binding fragment, Fab）,。"Y"的柄部稱結晶片段（crystalline fragment,FC），糖結合在FC 上,。
標記抗體：
　 　抗體經(jīng)過酶標記,、鐵蛋白標記或通過膠體金標記獲得標記抗體，是免疫電鏡樣品制備的一種方法,，用于觀察抗原抗體免疫復合物方面研究的手段,。