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更新時間:2018-09-12 09:53:00瀏覽次數(shù):983
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液體連四硫酸鹽培養(yǎng)基
美國藥典培養(yǎng)基(USP標準)
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單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),,叫做抗原決定簇,。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,,因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,,zui終產(chǎn)生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,,純系的英文為Clone,,音譯就是克隆,。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,,就象導(dǎo)彈精確地命中目標一樣,。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體,。
抗體的功能:
抗體的主要功能是與抗原(包括外來的和自身的)相結(jié)合,,從而有效地清除侵入機體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物,,抗體(antibody)是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的,、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合,。這種結(jié)合可以使抗原失活,,也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害,如抗核抗體,、抗雙鏈DNA抗體,、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生,對人體可造成危害,。
抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示,。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,,求出各自在 IC50時的濃度,,并按下列公式計算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,,表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好,。
生物活性:
?。?)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷,。然而,,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
?。?)激活補體:IgM,、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,,凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
?。?)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,,參與免疫應(yīng)答,。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,,使胎兒形成自然被動免疫,。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素,。
?。?)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子,,各具有不同的抗原性。
?。?)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),,均能破壞抗體的作用,。抗體可被中性鹽類沉淀,。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化,。
?。?)通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) ①調(diào)理作用 IgG,、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR,、FcμR結(jié)合,增強其吞噬能力,,通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization),。 ?、诎l(fā)揮抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
1,、制備抗原,。
2、選擇實驗動物,。
3,、動物免疫。
4,、試取血進行測試,,看看是否成功免疫。
5,、如果成功免疫,,殺死實驗動物,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。包括純度以及特異性。