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更新時(shí)間:2018-09-12 09:53:01瀏覽次數(shù):1170
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伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(Levine)
美國(guó)藥典培養(yǎng)基(USP標(biāo)準(zhǔn))
250g
弱選擇性培養(yǎng)基,,用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
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相關(guān)知識(shí)>>>>>
單克隆抗體:
?。╩onoclonal antibody,,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細(xì)胞帶一種受體,,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,使之活化,,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,,分泌同樣的抗體。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),,在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,,如果要把這些抗體一一分開,,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),,開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,,兔單抗具有:首先,,兔抗血清通常含有高親和力抗體,,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位,;其次,,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原;第三,,由于兔脾臟較大,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),,使得高通量篩選融合成為可能,。
單克隆抗體:
?。╩onoclonal antibody,,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細(xì)胞帶一種受體,,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,,分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,,如果要把這些抗體一一分開,,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的,。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),,開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,,兔單抗具有:首先,,兔抗血清通常含有高親和力抗體,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位,;其次,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,;第三,,由于兔脾臟較大,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),,使得高通量篩選融合成為可能,。
抗體(antibody)
指機(jī)體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下,由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的,、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白,。主要分布在血清中,也分布于組織液及外分泌液中,。
一抗體和二抗體:
一抗是針對(duì)抗原的抗體,,二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體,。
*抗體就是我們平時(shí)所說(shuō)的抗體,,它能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合,,即抗體的抗體,,其主要作用是檢測(cè)抗體的存在。
抗體規(guī)律:
?。?)初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時(shí),,需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體,且抗體產(chǎn)生的量也不多,,在體內(nèi)維持的時(shí)間也較短,。
(2)再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體:當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后,,開始時(shí),,由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合,可使原有抗體量略為降低,。隨后,,抗體效價(jià)迅速大量增加,可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍,在體內(nèi)留存的時(shí)間亦較長(zhǎng),。
?。?)回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體:由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后可逐漸消失,。此時(shí)若再次接觸抗原,,可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同,,則稱為特異性回憶反應(yīng),;若與初次反應(yīng)不同,則稱為非特異性回憶反應(yīng),。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時(shí)性的,,短時(shí)間內(nèi)即很快下降。
蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,,它們的分子量低于10,,000Da(Dalton,道爾頓),,能透過(guò)半透膜,,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽),;10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽,;由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,,由核酸編碼的α氨基酸之間通過(guò)α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子,。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物。
就是:都是由20種基本氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫為:C,、H、O,、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,區(qū)別如下:
?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,,一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成),也可由多條肽鏈通過(guò)一定的化學(xué)鍵(肯定不是肽鍵,如二硫鍵,、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等),。
②多肽與蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無(wú)生物活性,,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的。多肽一般無(wú)活性(如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),,少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),與蛋白質(zhì)相比,,多肽的分子量較小,沒有空間結(jié)構(gòu),,一般無(wú)活性,;蛋白質(zhì)的分子量較大,有空間結(jié)構(gòu),,有活性(變性后活性下降或消失,,活性消失叫做失活)
因此,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成:
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),,經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),,表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),,從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種:固相合成和液相多肽合成,。