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人金屬硫蛋白（MT）ELISA試劑盒

Human Metallothionein,MT ELISA Kit

包裝：96T/48T
檢測標本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。
保存：2-8℃,，一年,。

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人金屬硫蛋白（MT）ELISA試劑盒供應(yīng)商：

上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒、omega試劑盒,、抗體,、動物血清、標準品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障,。垂詢,！

相關(guān)知識>>>>>>>
采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存：2-8℃
樣品類型（SAMPLE TYPES）：
標本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等
1ml的全血可得到0.5ml的血清 或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書,。
操作步驟
1． 使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。
4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
7． 每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8． 取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值,。
細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的 成份時,，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀 釋細胞懸液,，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
組織標本：
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的 PBS ,，緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）。用手工或勻漿器將標本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。
操作注意事項
1． 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,，不可保存。
2． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì)。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A,、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應(yīng)*,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。