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人β2糖蛋白1抗體IgM（β2-GP1 Ab IgM）ELISA試劑盒

Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM,β2-GP1 Ab IgM ELISA Kit

包裝：96T/48T
檢測標本：包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存：2-8℃,，一年,。

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人β2糖蛋白1抗體IgM（β2-GP1 Ab IgM）ELISA試劑盒供應商：

上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒、omega試劑盒,、抗體,、動物血清、標準品等生物試劑,產(chǎn)品質量有保證,售后服務有保障,。垂詢,！

相關知識>>>>>>>
操作步驟：
參照說明書（具體說明書請發(fā)郵件::shkbsw）
靈敏度：
具體請查看說明書.
檢測范圍（RANGN）：
具體請查看說明書.
結果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陽性
操作步驟
1． 使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內,。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。
4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6． 甩去孔內液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7． 每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8． 取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果,。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值,。
細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）,。仔細收集上清。檢測細胞內的 成份時,，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀 釋細胞懸液,，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
組織標本：
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的 PBS ，緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）,。用手工或勻漿器將標本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。
建議使用的實驗方案
標準品濃度（mIU/ml）
A 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 1.25 1.25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200、500ul,、1000ul,。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。