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更新時(shí)間:2018-09-12 09:53:01瀏覽次數(shù):726
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大豆-干酪素消化物瓊脂培養(yǎng)基
美國藥典培養(yǎng)基(USP標(biāo)準(zhǔn))
250g
一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基,,用于
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抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力,。抗體的特異性高,,它的識(shí)別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,,計(jì)算各自的結(jié)合率,,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,,即該血清的特異性較好,。
抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體,,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,,包括有試管凝集反應(yīng),、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定,。
單克隆抗體:
(monoclonal antibody,,McAb)克隆選擇學(xué)說:淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,,一種細(xì)胞帶一種受體,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,,使之活化,,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),,在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開,,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的,。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年,Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),,開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù),。與鼠單抗相比,,兔單抗具有:首先,兔抗血清通常含有高親和力抗體,,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位,;其次,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,;第三,,由于兔脾臟較大,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),,使得高通量篩選融合成為可能,。
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇,。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,zui終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞,。只針對(duì)一個(gè)抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個(gè)純系,,純系的英文為Clone,音譯就是克隆,。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣,。另一方面,,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,,形成好幾種單克隆抗體混雜物,,稱為多克隆抗體。
抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一,。鑒定效價(jià)的方法很多,,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較,。如制備抗抗體的效價(jià),,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。