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更新時(shí)間:2018-09-12 09:53:01瀏覽次數(shù):1270
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念珠菌顯色培養(yǎng)基
顯色培養(yǎng)基
1000ml
用于念珠菌分離和鑒定,,白色念珠菌顯綠色
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相關(guān)知識(shí)>>>>>
抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力,。抗體的特異性高,,它的識(shí)別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,,即該血清的特異性較好,。
生物活性:
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷,。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,,直接發(fā)揮中和病毒的作用,。
(2)激活補(bǔ)體:IgM,、IgG1,、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體,。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答,。
?。?)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫,。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
?。?)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),,也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,,各具有不同的抗原性,。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,,60~70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用,??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,,再經(jīng)透析法將其純化,。
(7)通過與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) ?、僬{(diào)理作用 IgG,、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合,,增強(qiáng)其吞噬能力,,通常將抗體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。 ?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用,。
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),,叫做抗原決定簇,。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,,zui終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞,。只針對(duì)一個(gè)抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個(gè)純系,純系的英文為Clone,,音譯就是克隆,。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,,就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣,。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體,。
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,,可將其分為IgM、IgG,、IgA,、IgE、IgD五類,。
IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體,。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來,,聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬,;
IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時(shí)間長,,是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護(hù)胎兒的抗體,。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,使新生兒得到保護(hù),;
IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,,包括呼吸、消化,、生殖等管道的黏膜,,中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,,是在母乳中含量zui多,,zui為重要的一類抗體;
IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞,、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合,。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應(yīng)的抗體,;
IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān),。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),分子量為175kD,,主要由扁桃體,、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,,在個(gè)體發(fā)育中合成較晚,。IgD鉸鏈區(qū)很長,且對(duì)蛋白酶水解敏感,,因此IgD半衰期很短,,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,,除了表達(dá)SmIgD,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),,SmIgD逐漸消失。)
蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,,它們的分子量低于10,,000Da(Dalton,道爾頓),,能透過半透膜,,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽);10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽,;由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是:都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡寫為:C,、H,、O、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,,區(qū)別如下:
?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,,一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成),也可由多條肽鏈通過一定的化學(xué)鍵(肯定不是肽鍵,,如二硫鍵,、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成,、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等)。
?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無生物活性,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無活性(如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),,與蛋白質(zhì)相比,,多肽的分子量較小,沒有空間結(jié)構(gòu),,一般無活性,;蛋白質(zhì)的分子量較大,,有空間結(jié)構(gòu),有活性(變性后活性下降或消失,,活性消失叫做失活)
因此,,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì)。
多肽合成:
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過程,,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成,。過去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,,經(jīng)過不斷的改進(jìn)和完善,,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),,從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來說分成兩種:固相合成和液相多肽合成。