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更新時(shí)間:2018-09-12 09:53:03瀏覽次數(shù):727
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標(biāo)記抗體:
抗體經(jīng)過(guò)酶標(biāo)記,、鐵蛋白標(biāo)記或通過(guò)膠體金標(biāo)記獲得標(biāo)記抗體,是免疫電鏡樣品制備的一種方法,,用于觀察抗原抗體免疫復(fù)合物方面研究的手段,。
抗體的親和力 :
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,,K的單位是L/mol,,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達(dá) 1014 /mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
標(biāo)記抗體:
抗體經(jīng)過(guò)酶標(biāo)記,、鐵蛋白標(biāo)記或通過(guò)膠體金標(biāo)記獲得標(biāo)記抗體,,是免疫電鏡樣品制備的一種方法,用于觀察抗原抗體免疫復(fù)合物方面研究的手段,。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
1,、制備抗原。
2,、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,。
3、動(dòng)物免疫,。
4,、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫,。
5,、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。包括純度以及特異性,。
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,可將其分為IgM,、IgG,、IgA、IgE,、IgD五類,。
IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng),。它們還把入侵者相互連接起來(lái),,聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;
IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng),是*能在母親妊娠期穿過(guò)胎盤保護(hù)胎兒的抗體,。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,,使新生兒得到保護(hù),;
IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,,包括呼吸,、消化,、生殖等管道的黏膜,,中和感染因子,。還可以通過(guò)母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,,是在母乳中含量zui多,,zui為重要的一類抗體;
IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞,、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)的抗體;
IgD抗體的作用還不太清楚,。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān)。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),,分子量為175kD,,主要由扁桃體、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,,在個(gè)體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),且對(duì)蛋白酶水解敏感,,因此IgD半衰期很短,,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,,除了表達(dá)SmIgD,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),,SmIgD逐漸消失。)