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人胰島淀粉樣多肽（IAPP）ELISA試劑盒

Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit

包裝：96T/48T
檢測標本：包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。
保存：2-8℃,，一年。

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人胰島淀粉樣多肽（IAPP）ELISA試劑盒 供應商：

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相關(guān)知識>>>>>>>
細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的 成份時,，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀 釋細胞懸液，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
組織標本：
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的 PBS ，緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）,。用手工或勻漿器將標本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
試劑的準備
1． 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備,，不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：
800 pg/ml （6號標準品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
400 pg/ml （5號標準品） 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
200 pg/ml （4號標準品） 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
100 pg/ml （3號標準品） 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50 pg/ml （2號標準品） 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
25 pg/ml （1號標準品） 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 pg/ml （空白對照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul,。
2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作注意事項
1． 試劑應按標簽說明書儲存,，使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存,。
2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6． 洗滌酶標板時應充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
7． 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應*,，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
操作注意事項
1． 試劑應按標簽說明書儲存,，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,，不可保存,。
2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
7． 底物A應揮發(fā),，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
8． 加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
9． 按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
建議使用的實驗方案
標準品濃度（mIU/ml）
A 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 1.25 1.25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品