Hoechst33258染色試劑盒
細胞凋亡熒光Hoechst 33258檢測試劑盒
（Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit）
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Expire date：
一,、試劑盒說明
細胞凋亡時產(chǎn)生zui顯著的變化是染色體固縮，DNA裂解使細胞核形態(tài)產(chǎn)發(fā)生變化,。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258是一種無毒,、水溶性雙苯咪唑類化合物，可作為熒光探針與DNA分子結合,。在凋亡細胞中,，細胞膜對Hoechst 33258的攝取增高，并且由于染色體高度濃縮,，Hoechst 33258與之結合增強,，染色呈強藍色熒光，而正常細胞只呈微弱熒光,，死細胞則不被染色,，由此可檢測出凋亡。
二,、試劑盒組份
| 組份 | KGA211（100 assays） | 儲存條件 |
| Hoechst 33258 | 1.0 mL | 4℃,，避光 |
| Buffer A | 25 mL | 4℃ |
注: Hoechst 33258工作液的配制：使用前，取試驗盒中Hoechst 33258原液用蒸餾水稀釋10倍,。
三,、試劑盒以外自備儀器和試劑
熒光顯微鏡、低速離心機,、微量移液器,、1.5m L Microtube、載玻片,、蓋玻片,、4%甲醛溶液
四、使用注意事項
1． 染色時間嚴格控制,，染色過久可導致假陽性,。
2． 由于不同細胞對Hoechst 33258的攝取能力不同，該法不一定適用所有細胞,。
五,、操作方法
1. 用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡；
2. 用冷Buffer A洗滌細胞二次,，離心收集 106細胞于1.5mL微量離心管中,；
（貼壁細胞原位固定染色）
3. 加入1mL 的4%甲醛溶液（用戶自備），4℃固定細胞10min,；
4. 離心去固定液,，用Buffer A洗兩遍；離心后留50～100μL Buffer A重懸細胞,；
5. 取上步驟50～100μL細胞懸液涂片,，自然晾干,；
6. 滴加100μL Hoechst 33258工作液（備注1），室溫染色10 min,，水沖凈晾干,；
7. 以紫外光340nm波長激發(fā)，熒光顯微鏡下觀察,。
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