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超微量分光光度計(jì)選購指南
你們實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)應(yīng)用有哪些,?未來會(huì)增加或改變嗎,?
你需要丈量的樣品體積范圍?假如它變化很大,,你需要著重考慮分光光度計(jì)的樣品量和靈活性,。
你是否需要同時(shí)丈量多個(gè)樣品?
你需要什么樣的靈敏度,?對(duì)于低濃度樣品,,3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。
有多少人會(huì)共用這一臺(tái)分光光度計(jì),?假如多人共用,,預(yù)設(shè)程序可能會(huì)比較方便。
分光光度計(jì)的波長是選購時(shí)要考慮的重要因素之一,。在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,,一臺(tái)覆蓋紫外光和可見光的分光光度計(jì)是*的。這7款分光光度計(jì)都采用氙燈,,覆蓋了200-780 nm的紫外/可見光波長,,其中Vision和NanoVue的波長更是達(dá)到1100 nm,適合一些近紅外研究,。
分光光度計(jì)的帶寬(bandwidth)很大程度上依靠于單色儀的狹縫的寬度,。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光丈量。對(duì)于定量分析而言,,3 - 5 nm比較合適,。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要,,當(dāng)然,,價(jià)格也更高。
在檢測器方面,,CCD陣列更為普及,。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍,,不僅光利用率得到改善,,信噪比也得以進(jìn)步。另外,,CCD 陣列系統(tǒng)采用模塊化處理,,使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點(diǎn)真空管檢測器,。
樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿,,動(dòng)輒50 ul,,對(duì)于珍貴樣品來說那可真是大出血。因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計(jì)都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜),。這幾款分光光度計(jì)中,,NanoDrop、BioSpec-nano,、SMA4000和NanoVue都無需比色皿,,將樣品滴在特殊的表面上即可丈量,所需的樣品量在2 ul或以下,,NanoDrop和NanoVue的低樣品量只有0.5 ul,,這下測濃度時(shí)不專心痛了吧。這種方法檢測范圍超寬,,無需對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,。稀釋樣品不僅耽誤時(shí)間,在正確性上也是大打折扣,。AlphaSpec是在特制的吸頭中丈量,,樣品量也為2 ul。特制的一次性吸頭確保檢測后樣品可以回收,,連一點(diǎn)一滴都盡不浪費(fèi),。Vision可配合不同的比色皿,樣品量在5 ul到2 ml之間,。