QQ交談Pfu DNA 聚合酶
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- 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
- 100元（具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)）
- 2024-08-27 21:41:02
- 上海市
- 上海
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【簡單介紹】
【詳細(xì)說明】
· Pfu DNA 聚合酶內(nèi)容 （250 U）
目錄號 規(guī)格 備注 價格 說明書下載 E002-01A 250U 含dNTP 230元 
E002-01B A包裝×5 含dNTP 1035元 E002-02A 250U 不含dNTP 180元 E002-02B A包裝×5 不含dNTP 810元
| Pfu DNA聚合酶（5 U/μl） | 50 μl |
| dNTP 混合液 （各10 mM） | 250 μl |
| 10 × Pfu Buffer with Mg2+ | 1 ml |
· Pfu DNA 聚合酶說明
本酶為Pyrococcus furiosus中分離的pfu DNA pol 基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后經(jīng)多次純化分離而得,。Pfu DNA聚合酶具有3’-5’外切酶（校正）活性,，當(dāng)聚合反應(yīng)發(fā)生堿基錯配時，聚合酶的校正活性可將錯配的堿基切除,。Pfu DNA聚合酶為使用范圍zui廣的高保真DNA聚合酶,，其錯誤率僅為1.3x10-6，推薦Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反應(yīng),。
· 用途
用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),，包括克隆PCR、DNA片段拼接,、引入突變,、全基因合成等（參見 Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案）。
· 產(chǎn)品特點(diǎn)
高保真：Pfu DNA聚合酶是使用zui廣泛的高保真酶,，其保真度為普通Taq酶的10倍,。
靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段（圖例一）。
快捷：PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,，數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配置,。
便利：10μl, 25μl 或50μl體系全部適用,。
· 質(zhì)量保證
經(jīng)多次柱純化,，SDS-PAGE檢測純度大于95%；
PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,，無核酸內(nèi),、外切酶污染,。
· 使用建議
Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端，無3’端"A"突出,，其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案,。
1. PCR前引物進(jìn)行5’端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中（參見 Sinobio實(shí)驗(yàn)方案）。
2. 將產(chǎn)物3’末端加A后再與T-Vector連接（參見 Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案）,。
3. 由于Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解,。因此在設(shè)計引物時應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度，理想的引物長度為20-30堿基,。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,，盡量在冰上配置反應(yīng)體系，并zui后加入Pfu酶,。
· 相關(guān)圖片
· 其他說明
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