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78PEI MAX 40K轉染試劑 說明書

??產品概述

化學名：線性聚乙烯亞胺,，線性PEI,，聚乙烯亞胺,，線性,，MW 40000，轉染級,、線性聚乙烯亞胺（分子量40000）

訂貨號： 78pei40000

規(guī)格：100mg/500mg/5g

品牌：BIOHUB

CAS：49553-93-7

分子量：40,000（~22,000自由基）

溶于：水          

不溶于：常用有機溶劑（乙醇,，丙酮，四氫呋口南）

外觀：白色至灰白色自由流動的固體

處理：手套和通風櫥

儲存：在室溫下避光干燥儲存

介紹：

1.78PEI MAX 40K轉染試劑（在游離堿中也稱為PEI 22K）是一種功能強大,，值得信賴且經濟實惠的瞬時轉染試劑,。在HEK293和CHO大多數表達系統中，PEI MAX都能提供穩(wěn)定的高表達（96孔板至100L生物反應器）?，F在每年有更多的研究人員和公司來使用PEI MAX進行細胞轉染,，因為相對于大多數轉染試劑而言 PEI MAX既能等到穩(wěn)定的高表達又能使轉染成本降低少40%。

2.78PEI MAX 40K比更PEI 25K易于使用,，并且比PEI 25K有更高的轉染效率,，通常PEI 25K轉染過程通常需要幾個小時才能完成準備，而PEI MAX 40K可在兩小時內完成整個轉染過程,。另外,，PEI 25K含有4-11％的殘留丙酰基,，這可能阻礙聚合物主鏈與DNA的有效結合,，而PEI MAX 40K的丙酰基易脫落,，意味著PEI MAX每批產品的性能更加穩(wěn)定,。

??產品配置方法

1. 儲存液配制（1 mg/mL）  

-材料：78PEI40000粉末、超純水,、1N NaOH,、0.1 μm濾膜  

-步驟：  

 ① 取1g粉末溶于900 mL超純水，磁力攪拌至溶解,；  

 ② 滴加1N NaOH調節(jié)pH至6.9-7.1（若超限則用1N HCl回調）,；  

 ③ 定容至1L，0.1 μm濾膜過濾除菌,；  

 ④ 分裝后4℃保存,，液體有效期6個月,，凍干粉有效期1年。  

2. 工作液配制  

- 按1 μg DNA : 1-5 μL 78PEI40000儲存液的比例稀釋（推薦初始比例1:3）,；  

- 使用無血清培養(yǎng)基（如Opti-MEM）稀釋DNA和PEI,，室溫靜置10-25分鐘形成復合物。

??轉染操作流程

（一）貼壁細胞轉染  

1.細胞接種：轉染前24小時接種細胞,，密度達70%-80%匯合度,，更換為含5%血清的培養(yǎng)基；  

2.復合物孵育：將DNA-PEI復合物逐滴加入培養(yǎng)皿,，輕柔渦旋后孵育4-6小時,；  

3.換液與檢測：更換新鮮培養(yǎng)基，7小時后可檢測基因表達,，24小時后傳代并添加篩選藥物,。  

（二）懸浮細胞轉染  

1.細胞準備：調整細胞密度至1×10? cells/mL，搖床培養(yǎng)2-4小時,；  

2.復合物添加：將DNA-PEI復合物直接滴加至搖瓶,，持續(xù)振蕩培養(yǎng)24-72小時；  

3.擴增優(yōu)化：轉染24小時后可稀釋細胞（1:2-1:5）以提高蛋白產量,。  

?關鍵注意事項  

1.溶解要求：  

  - 必須充分溶解,，未溶解顆粒會導致轉染效率下降；  

  - 建議使用NEST 5 mL/14 mL離心管處理大體積溶液,。  

2.pH控制：  

  - 初始溶解時pH需精確調節(jié)至6.9-7.1,，過高或過低均影響復合物形成。  

3.細胞狀態(tài)：

  - 推薦使用對數生長期細胞,，避免消化過度損傷細胞膜,。  

4.毒性控制：  

  - 高密度細胞（>90%匯合度）需降低PEI用量（推薦比例1:1）。  

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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，具體以品牌信息文檔為準,。）