總抗氧化能力(FRAP法)測試盒

商品詳情：
測定意義：

測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平,。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿,、血清,、唾液、尿液等各種體液,，細(xì)胞或組織等裂解液,、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理：

在酸性環(huán)境下,，抗氧化物質(zhì)還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力,。

自備實(shí)驗(yàn)用品：

恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿,，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min,；自來水冷卻后,，8000g，,，4℃離心10min,，上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴,，功率20％或200W,，超聲3s，間隔10s,，重復(fù)30次）,；8000g，4℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。

3.血清等液體：直接檢測,。

計(jì)算公式如下：

1,、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2,、組織,、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位,。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位,。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L,；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑,，1cm,；V樣：加入樣本體積，0.05 mL,；V樣總：加入提取液體積,，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬,。

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NADP蘋果酶（NADPME）比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

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NAD蘋果酶（NADME）比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

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注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三,、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存,，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢,。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),，如果測定的吸光值過高（高于2.5）,，用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量,。

4．檢出限為100μmol/L,。