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BCA蛋白法含量測試盒測定意義：

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析,。

測定原理：

堿性條件下,，蛋白質(zhì)中半胱氨suan,、胱氨suan,、色氨、酪氨以及肽鍵,，能將Cu2+還原成Cu+,；2分子的BCA與Cu+結(jié)合，生成紫色絡(luò)合物,，在540-595nm有吸收峰,，562nm處吸收峰最。

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板,、移液器和蒸餾水,。
試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶,，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶,，4℃保存,。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存,。臨用前加入667μL無水乙醇,，蓋緊后充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻,，避光保存,。

試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存,。臨用前加1 mL蒸餾水,，充分溶解。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶,，臨用前加10 mL蒸餾水,，充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,，4℃避光保存,。

測定操作：

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到570 nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二,，100μL試劑三和10μL試劑四,，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min,，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,，于570nm測定吸光值，記為A空白管,。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完,。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,，100μL試劑二,，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min,，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測定吸光值,，記為A標(biāo)準(zhǔn)管,。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。

4. 測定管：取EP管,，加入10μL上清液,，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四,，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,，于570nm測定吸光值,，記為A測定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完,。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測定一次,。

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