亞鐵氧化酶(HP)測試盒H作為銅藍蛋白的同系物,是近年來發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運蛋白亞鐵氧化酶,，HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內(nèi)鐵代謝。HP的表達可受鐵,、銅及鋅等金屬離子的調(diào)節(jié)。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,，在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運中有重要作用,。

商品屬性：

商品詳情：
亞鐵氧化酶(HP)測試盒測定意義：

Hephaestin (HP)作為銅藍蛋白的同系物,是近年來發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運蛋白亞鐵氧化酶，HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內(nèi)鐵代謝,。HP的表達可受鐵,、銅及鋅等金屬離子的調(diào)節(jié)。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,，在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運中有重要作用,。

測定原理：

HP催化Fe2+氧化為Fe3+，F(xiàn)e2+和ferrozine反應(yīng)顯色,，在560 nm下有特征吸光值,。通過測定Fe2+的減少速率可測得亞鐵氧化酶的活性。

自備用品：

酶標儀,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶,，4℃保存,。

試劑二：液體×1瓶，4℃保存,。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色）,，4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,，蓋緊后充分混勻,，再加入9.333 mL蒸餾水混勻,，避光保存。

試劑四：粉劑×1管,，4℃避光保存,。臨用前加1 mL蒸餾水，充分溶解,。

標準品：粉劑×1瓶,，臨用前加10 mL蒸餾水，充分溶解,。1μmol/mL標準液,，4℃避光保存。

測定操作：

1. 分光光度計/酶標儀預(yù)熱30 min,，調(diào)節(jié)波長到570 nm,，蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管：取EP管,，加入10μL蒸餾水,，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四,，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,，于570nm測定吸光值,，記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完,。

3. 標準管：取EP管，加入10μL標準品,，100μL試劑二,，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min,，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測定吸光值,，記為A標準管,。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。

4. 測定管：取EP管,，加入10μL上清液,，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四,，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min,，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測定吸光值,，記為A測定管,。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。

注意：空白管和標準管只需要測定一次,。

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