在ELISA檢測(cè)試劑盒中,，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,，其中包括：使用ELISA檢測(cè)試劑盒進(jìn)行試驗(yàn)時(shí),，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份，有時(shí)本底較高,，說明有非特異性反應(yīng),。

固相載體的選擇：

       許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

       包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí),，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。

注意以下事項(xiàng)：

1.確定ELISA檢測(cè)試劑盒在有效期內(nèi),。

2.仔細(xì)閱讀說明書,。

3.按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）。

4.標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,，注意低溫保存。

5.根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量,。

6.準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,，如試管、吸頭,、移液器,、離心機(jī)等。

7.按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑,。