PCR基因擴(kuò)增法在“Torsch”診斷中的應(yīng)用

在妊娠早期（1-3個(gè)月）,，有些病原微生物的感染易導(dǎo)致胎兒畸形，這些病原體中zui常見的有弓體,、風(fēng)疹病毒,、單純皰疹病毒、沙眼衣原體,、及巨細(xì)胞,，對這幾種病原體的檢測根據(jù)其英文詞首簡稱為Torsch試驗(yàn)。
 
（一）,、弓形體的PCR檢測,，弓形體有廣泛的自然疫原性，人體多為隱性感染,，抵抗力低時(shí)可以有臨床表現(xiàn),。弓形體的診斷較困難，血清學(xué)方法敏感性較高但有交叉性出現(xiàn)假陽性而且無法確定近期感染,、遠(yuǎn)期感染或一過性感染,。確診的方法是活組織檢查或動(dòng)物接各，這些方法陽性率太低不能推廣,。PCR檢測可以檢出樣本中1-2個(gè)病原體而且準(zhǔn)確性高,，是目前對弓形體檢測zui的方法。作為優(yōu)生優(yōu)育檢查應(yīng)于妊娠前或妊娠早期取全血樣本,，可以用EDTA或肝素抗凝,，以EDTA抗凝效果，檢測外周血白細(xì)胞中是否有TOX存在,。對于不孕,，多次自然流產(chǎn)或養(yǎng)小動(dòng)物的產(chǎn)期婦女,，作弓形蟲檢測有更重要的臨床意義。 

（二）,、單純皰診病毒,，單純皰疹病毒（herpes simplex virus,HSV）是一種DNA病毒，可引起多器官的炎癥,，可通過性接觸傳播,。HSVⅡ感染復(fù)發(fā)率高，80%的感染者于12個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā),。HSV感染后經(jīng)機(jī)體免疫系統(tǒng)清除,，少數(shù)病人終生攜帶，體弱時(shí)復(fù)發(fā),。PCR法檢測HSV敏感性高而且可以直接對HSVⅠ/Ⅱ型進(jìn)行分型鑒定,。

（三）、風(fēng)疹病毒感染：風(fēng)疹病毒（RV）是一種單股正極性RNA病毒,，人是風(fēng)診病毒的*宿主,。RV感染可以引起胎兒的畸形，影響胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育,，因此RV檢測在優(yōu)生優(yōu)育工作中顯得非常重要,。RV檢測可以用直接培養(yǎng)法及IgM抗體測試法。培養(yǎng)法費(fèi)時(shí)很長而且常受到其它病毒的干擾,，IgM測定法結(jié)果了不太準(zhǔn)確,，PCR法敏感性及特異性都很高而且簡便快速，是RV感染zui的測試方法之一,。風(fēng)疹病毒侵入體內(nèi)后在上呼吸道增殖而出現(xiàn)癥狀,，面部出現(xiàn)丘疹，迅速遍及全身,。樣本采用妊娠母親的咽部拭子,、血清、產(chǎn)婦的絨毛或妊娠如羊水等,。RV病毒是RNA病毒,，PCR擴(kuò)增較復(fù)雜，應(yīng)注意樣本的采集時(shí)機(jī),，操作的準(zhǔn)確性,。

（四）、人巨細(xì)胞（HCMV）,，HCMV感染十分普遍,，除少數(shù)原發(fā)性感染發(fā)生原發(fā)性單核細(xì)胞增多癥外，很大多數(shù)為隱性感染,。HCMV可以長期潛伏在體內(nèi),，當(dāng)機(jī)體免疫功能低下時(shí)，病毒會(huì)激活而造成嚴(yán)重疾病在妊娠期如果孕婦感染HCMV可以引起早產(chǎn),、畸型,、死胎及新生兒巨細(xì)胞包涵體病等。HCMV屬皰疹病毒科,，可以從唾液,、尿、宮頸分泌物及乳汁排出,。HCMV“金標(biāo)準(zhǔn)”的診斷試驗(yàn)是用單層成纖維細(xì)胞作病毒培養(yǎng),，其它的實(shí)驗(yàn)檢查有血清學(xué)的檢測及包涵體檢測。PCR是HCMV檢測的一種新方法,，用于檢測的樣本有血,，生殖道分泌物拭子等，用于優(yōu)生優(yōu)育檢測時(shí)應(yīng)取血樣本,。對于早期妊娠病人若有HCMV感染應(yīng)再檢測羊水,，或其它妊娠物，對病人認(rèn)真及進(jìn)跟蹤檢查,，綜合判斷并采取相應(yīng)的醫(yī)療措施,。 

（五）、沙眼衣原體,，沙眼衣原體（CT）不僅能引起沙眼而且能引起生死器感染,，是一種性傳播性疾病。與淋?。∟G）,，梅毒等經(jīng)典性傳播性疾病不同，CT易經(jīng)其它接觸途徑傳播,，少數(shù)地區(qū)對妊娠期婦女普查結(jié)果表明此人群中發(fā)病率高達(dá)20%-30%,。在歐美等國家CT的感染已超過淋病而居性傳播性疾病。衣原體感染常呈無癥性或非特異性癥狀的隱性感染,，不容易診斷,。以往用培養(yǎng)法進(jìn)行確診，費(fèi)時(shí)且敏感性,、準(zhǔn)確性都不足,。PCR用于CT檢測時(shí)應(yīng)注意不同檢測目的的取材不同，對于性傳播性疾病診斷應(yīng)取生殖道分泌物（查脫落細(xì)胞）,，而對于早期妊娠病人應(yīng)查其全血樣本,，在妊娠后期或臨產(chǎn)時(shí)再查陰道分泌物以便指導(dǎo)生育時(shí)產(chǎn)道清理。