由于Elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高,、靈敏度高,、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn)，深受廣大師生朋友的喜愛,。而現(xiàn)試劑盒種類頗多,，產(chǎn)品的選擇成為了實(shí)驗(yàn)前的重點(diǎn)事項(xiàng)。那么該如何選擇合適的Elisa試劑盒呢,？下面研域生物帶大家了解 一下,！

一、檢測(cè)方式

如今檢測(cè)Elisa試劑盒有許多途徑,，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇,。一般Elisa檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶,，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物,。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色，可以通過分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè),，堿性磷酸酶ap也是一種常用酶,。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上,，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合,。此外Elisa結(jié)果檢測(cè)還包括放射性檢測(cè)、熒光檢測(cè),、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測(cè)等,。

二、實(shí)驗(yàn)類型

雖然有多種類型,，不過它們都有一個(gè)共同特點(diǎn),，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲,。in-cell Elisa和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)elispot是兩種特殊的類型,，in-cell Elisa需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè),。elispot有點(diǎn)像蛋白印跡western blot,，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，然后在膜上檢測(cè)細(xì)胞分泌的抗原形成斑點(diǎn),。此外,，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行Elisa實(shí)驗(yàn),。

三、抗體類型

單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于Elisa試劑盒檢測(cè),，實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好,。例如，對(duì)于雙抗夾心法而言,，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測(cè)有時(shí)更有幫助,。多抗能夠確保捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測(cè)擁有特定抗原表位的抗原,。

四,、交叉反應(yīng)

如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素,。盡管現(xiàn)在購買源自zhi定動(dòng)物的抗體越來越容易,，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行Elisa檢測(cè)時(shí),，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一抗,，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測(cè)用二抗與捕獲抗體結(jié)合,，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣,。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗，來避免上述問題,。