ELISA數(shù)據(jù)中雖然 表面 CD分子仍是用于免疫表型的常用的標(biāo)記 ,，但常規(guī)平行檢測(cè) 的CD分子卻有所增加,。研究者把其它細(xì)胞表面 的蛋白和細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記 物加入到免疫表型分析 中,，已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)做法 。因?yàn)檫@些進(jìn)展不可避免地使得 研究設(shè)計(jì)更加具有挑戰(zhàn)性，我們咨詢了一組專家來(lái)幫助您生成更可靠的免疫表型數(shù)據(jù) ,。

研究免疫表型 時(shí),，其復(fù)雜性是不同 的。

從基礎(chǔ)研究到臨床監(jiān)測(cè) ,，研究者 對(duì)這些 細(xì)胞 進(jìn)行 免疫 表型 分析 ,，有很多原因 。 Sartorius細(xì)胞 分析測(cè)試 開(kāi)發(fā) 經(jīng)理 MarkCarter指出 ,，免疫表型研究的范圍 從識(shí)別單一表型到復(fù)雜的多參數(shù)應(yīng)用 ,，比如 識(shí)別 從HIV 患者的血液樣本中提取 CD4+T細(xì)胞 。 他說(shuō) ：“在試劑 ,、儀器 和軟件 方面 的進(jìn)步 使得 免疫 表型 研究 更為 復(fù)雜 ,。" 例如 ，現(xiàn)在可以對(duì)分化 細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量控制 ,；描述 癌癥 及其 治療 反應(yīng) ,；研究 疾病 對(duì)病人 免疫系統(tǒng) 的影響 ；或者 為器官捐贈(zèng)的捐獻(xiàn)者 和接受者進(jìn)行 免疫 配對(duì) ,。

用到 的標(biāo)記 的數(shù)量和類型決定了免疫 表型 的目的 ,。 CellSignalingTechnology高級(jí) 開(kāi)發(fā) 科學(xué)家 SarahKlein博士指出 ：“流式細(xì)胞術(shù)免疫 表型分析的閱讀次數(shù)少為兩次 ，因?yàn)槟?總是 想將細(xì)胞 活性 的標(biāo)記 與你選擇 的標(biāo)記結(jié)合起來(lái) .“有些 實(shí)驗(yàn)室在有特殊問(wèn)題 要問(wèn)時(shí)會(huì) 做3-5個(gè)標(biāo)記 免疫表型分析 ,，而另一些 實(shí)驗(yàn)室 通常 在多個(gè) 平臺(tái) 上使用 10 -15 個(gè)標(biāo)簽組合 ,。 大數(shù)量的標(biāo)記只是生物信息學(xué) 平臺(tái) 的局限性 ，包括檢測(cè)技術(shù) ,、可獲得 的抗體 和分析 大型 面板 提供 的大量數(shù)據(jù) ,。

Bio -Rad流式細(xì)胞 學(xué)現(xiàn)場(chǎng) 營(yíng)銷專家 MikeBlundell對(duì)此 表示 贊同 ，并指出 ,，盡管可以單獨(dú)使用一種標(biāo)記 來(lái)識(shí)別特定類型 的細(xì)胞 (如T細(xì)胞 CD3或B細(xì)胞 CD19),，但是 確定 血液 中的一個(gè)普通譜系可能需要四個(gè)標(biāo)記 ，并確定特定的譜系組合 ,，就可以把這一 數(shù)字 增加 到八個(gè) ,。 他說(shuō)：“監(jiān)控 激活狀態(tài) 、記憶 狀態(tài) 和多個(gè) 子集 的譜系 通常 需要 超過(guò)20個(gè)標(biāo)記 ,。 比如,，即使 只看T細(xì)胞亞群，你通常也想要確定樣品中其他類型的細(xì)胞 ,，以確保他們不會(huì)受到影響 ,，或者從你的分析中去除這些細(xì)胞 。

在面板中可以包含的標(biāo)簽 越多,，需要用到的樣本 就越少 ,，"MichelleM.Poulin博士解釋道,。Fluidigm質(zhì)譜流式細(xì)胞術(shù)領(lǐng)域應(yīng)用的高級(jí)經(jīng)理。研究者們用質(zhì)譜流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)來(lái)進(jìn)行免疫表型分析,，通常會(huì)將超過(guò)30到40個(gè)標(biāo)記結(jié)合在一起 ,。