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通常氣泡都是聚集在ELISA試劑盒酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一,。很多說明書、教科書上也都提到,,加樣時要避免出現(xiàn)氣泡,,這到底是什么原因呢?因為在做實驗的過程中,,有時為了打干凈槍頭里面的液體,,很容易產(chǎn)生氣泡,是不是這樣對實驗結(jié)果會后什么影響,?
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一,。
3.包被時有氣泡的話,,將導(dǎo)致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
4.封閉時有氣泡的話,,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點的存在,,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性,。
5.加樣時有氣泡的話,,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
6.加二抗時有氣泡的話,,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性),。
7.加顯色液時有氣泡的話---顯色不*。
8.加終止液時有氣泡的話(1,、不能*終止反應(yīng) 2,、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
9.洗滌時有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能*洗去,,做無用功,。
避免方法:
1、加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),,用力均勻,,不要過快過猛。
2,、封閉時一定要加滿孔,,
3、洗滌時一定要加滿孔(重要),,氣泡會浮上來*終驅(qū)除,。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。
ELISA試劑盒科研研究已進(jìn)入全新時代,,愛好生物研究的學(xué)者越來越多,。不管您是花幾百還是上千,甚至上萬去購置試劑,,這都是*簡單的步,。您之后需要付出更多的是大量的時間和精力,再加上您的耐心和用心,,才有可能把這條路走的更遠(yuǎn),。
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