兔ELISA試劑盒基本原理：
1.抗原或抗體能吸附到固相載體表面,，并保持其免疫學(xué)活性,；
2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,，仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性,；
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例，因此,，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果,。

兔ELISA試劑盒操作步驟：
1.使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時(shí)。
4.甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿(mǎn)洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6.甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8.取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案：6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到結(jié)果,。