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今早,,我公司吳收到由沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)朱老師發(fā)來的會話,。朱老師在2015年連續(xù)購買了6次ELISA試劑盒,上周,,朱老師我司技術(shù)說想要試試自己配的試劑盒,,看看檢測效果,。在朱老師給吳的會話中表示:“我的這個檢測結(jié)果不理想,不知道是哪里出了問題,。幫我看下是什么原因可以嗎,?”我公司試劑盒售后客服吳說可以,并為朱老師安排技術(shù)解析Elisa試劑盒測定結(jié)果,。
朱老師的主要問題是:我自己合成8個氨基酸的抗原短肽,,和BSA耦連后免疫動物,1個月后用ELISA測定血清中針對抗原短肽的抗體滴度,,具體步驟:用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板,,4度冰箱18小時,再用1%OVA37度封閉2小時,,洗板3次,。待測血清用10%小牛血清倍比稀釋,37度溫育1小時,,洗板3次,,加入二抗,37度溫育40分鐘,,洗板3次,,加TMB顯色,結(jié)果比較詭異,,陰性對照也顯色了,,且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢,?是洗板的問題嗎,?
十分鐘后,技術(shù)員給朱老師去解答,??梢愿鶕?jù)這幾個方面分析:
1.洗板是否串孔,如串孔的話可能造成污染;你一抗,、二抗每次洗板時洗5遍以上,。
2.封閉液的問題,你說陰性對照也顯色了,,那主要的問題應(yīng)該是封閉,,應(yīng)重新考慮用OVA封閉是否適合,如果OVA封閉效果不好的話可以選擇其他的封閉液,。封閉液的選擇園子里有很多相關(guān)的帖,,你搜一下看看。
3.建議ELISA試劑盒包被在37度兩小時,,這樣的效果可能會好一些,。
研域(上海)化學(xué)試劑有限公司Elisa試劑盒,,指標(biāo)齊全,種屬涉及人,、大鼠,、小鼠、豬,、雞,、植物等。保證質(zhì)量,,*,,提供全程技術(shù)指導(dǎo)服務(wù),歡迎您致電我司錢咨詢購買,。
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