體積排阻色譜柱的固定相是基于不同孔徑的多孔凝膠,,樣品組分和固定相之間原則上不存在相互作用,只讓臨界直徑小于凝膠孔大小的分子進入,,超過孔大小的物質(zhì)沒有保留而被排阻,。所以體積排阻色譜是嚴格依據(jù)分子大小進行分離。
Shim-pack Bio Diol系列體積排阻色譜柱在原有的技術(shù)上,,通過孔徑優(yōu)化,,開發(fā)出更適合單抗以及ADC藥物聚集體分析的體積排阻色譜柱。良好的質(zhì)量控制技術(shù)展現(xiàn)優(yōu)異的批次間穩(wěn)定性,。
采用Shim-pack Bio Diol-200,、250和300三種不同孔徑的色譜柱,分析9種不同分子量的蛋白質(zhì),。每個色譜柱都能分析幾乎所有的蛋白質(zhì),,但是它們擅長的分子量范圍和它們不擅長的分子量范圍是不同的。
(1,、藍色葡聚糖,, 2、甲狀腺球蛋白,,3,、鐵蛋白,4,、醛縮酶,,5、牛血清白蛋,,6,、卵清蛋,7,、碳酸酐酶,,8、核糖核酸酶A,,9,、脲酶)
峰4是一個與mAb具有相同分子量的蛋白質(zhì),,從圖中可以看出,Shim-pack Bio Diol-250在該峰與相鄰峰之間表現(xiàn)出良好的分離性,。結(jié)果表明,,Bio Diol-250適用于單抗分析。
系統(tǒng) : NexeraTM XR
流動相: 100 mmol/L Phosphate (Na) buffer (pH 6.8) + 150 mmol/L NaCl
流速: 0.4 mL/min
柱溫: 25℃
檢測器 : UV 280 nm
進樣量:20 µL
Shim-pack Biol Diol-250用于西妥昔單抗分離分析
西妥昔單抗由于柱上的二次吸附,,Diol-300沒有分離出聚集體,。對比Diol-200和Diol - 300,Shim-pack Diol-250對二聚體和單體的分離效果更好,。
系統(tǒng): NexeraTM XR
流動相: 100 mmol/L Phosphate (Na) buffer (pH 6.8) + 150 mmol/L NaCl
流速: 0.4 mL/min
柱溫: 室溫
檢測器: UV 280 nm
進樣器: 20 µL
Shim-pack Bio Diol-250
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