毒素(Tetrodotoxin,TTX)是豚魚類(俗稱河豚魚)及其它生物體內(nèi)含有的一種生物堿(氨基全氫喹唑啉型化合物),,是自然界中所發(fā)現(xiàn)的毒性至大的神經(jīng)毒素之一,。其毒性比劇毒還要高1250多倍,0.5mg即可致人于死命,。
免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,,從而對(duì)樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,過柱凈化后的樣品液可直接用于HPLC分析,。它與HPLC配合使用可達(dá)到快速測定的目的,,以改善信噪比,,提高檢測方法的準(zhǔn)確度。
測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),,抗體連接在柱體內(nèi),,樣品經(jīng)過提取、稀釋,,緩慢的通過免疫親和柱,,在柱內(nèi)毒素與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì),。用洗脫液洗脫毒素,,然后注入到分析儀器中用于檢測。
下面咱們來了解下免疫親和柱的操作方法:
1,、取出本產(chǎn)品,,將注射器筒的下端直接穿透親和柱上方的塞子,完成柱筒與柱的連接,,將其放置在氣控操作架上進(jìn)行固定,,去掉親和柱下方堵頭,排盡柱內(nèi)保存液,。
2,、取10mL的待上樣液,注入到注射器筒中,。
3,、調(diào)節(jié)開關(guān),使液體以1~2滴/秒的速度流出,。
4,、待液體排干,用10mL蒸餾水洗滌1次,,流速2~3滴/秒,。
5、待液體排干,,往柱管內(nèi)加入2mL洗脫液,,堵上親和柱堵頭靜置2min,用試管收集洗脫液,,流速1滴/秒,,再加入2mL洗脫液,收集洗脫液,,待液體排干后,,將洗脫液于40℃下氮?dú)獯抵两桑昧鲃?dòng)相定容至1mL。
6,、混勻后用0.22μm濾器過濾至樣品瓶進(jìn)行液相檢測,。
7、使用前,,需回至室溫(22~25℃),。
8、每次上樣前都要將柱內(nèi)上次液體*排干,。
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