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產(chǎn)品簡介:
伊紅染色液(水溶,5%)
伊紅(Eosin)又稱曙紅,,屬人工合成染料中的呫噸類染料,為桃紅色或粉紅色的粉末,。 分子式為 C20H6O5Br4Na2,,分子量為 691.86。伊紅適宜于蘇木精配合染色以顯示正?;虿±?/span>組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),。水溶性伊紅 Y 含有一個(gè)醌型苯環(huán)的發(fā)色團(tuán)和兩個(gè)形成鈉鹽的酸性助色團(tuán)(R-COONa、R-ONa),。這種形成鹽類的酸性染料在水中溶解時(shí)解離為帶負(fù)電荷的色酸部分(R-COO ,、R-O ),即染料的有色部分和帶正電荷的鈉離子部分(Na+),。染色時(shí)伊紅 Y 帶負(fù)電荷的色- 酸部分-不組織內(nèi)帶正電荷的物質(zhì)以離子鍵的形式結(jié)合而顯色,。伊紅染色液(Eosin Y Stain)采用 *防腐劑,操作簡單,,不使用汞,、甲醇等有毒試劑,可以用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色,??梢院兔庖?/span>熒光染色或免疫組化染 色配合使用。一方面可以在伊紅染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色,,另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行伊紅復(fù)染,。本染色液可以重復(fù)使用,直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液,,染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色,。
Eosin Y Stain(5%) 100ml 500ml RT 避 光
1、蒸餾水
2,、4%多聚甲醛
3,、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作,,如果用于普通染色應(yīng)稀釋后,參考如下步驟:
1,、樣品處理
a) 對(duì)于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟 5~10min,。
換用新鮮的二甲苯,再脫蠟 5~10min,。無水乙醇 5min,。
90%乙醇 2min。
70%乙醇 2min,。蒸餾水 2min,。
b) 對(duì)于冰凍切片:
蒸餾水 2min。
用 4%多聚甲醛固定 10min 以上,。蒸餾水洗滌 2 分鐘,。
換用新鮮的蒸餾水,再洗滌 2min,。
2,、伊紅染色:對(duì)于上述處理好的樣品,伊紅染色液染色 0.5~2min(根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間),。如果需要直接觀察,,可以用 70%乙醇洗滌 2 次。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理,。
注:如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染,,參考上述步驟在其它染色完成后進(jìn)行伊紅染色。
3,、脫水、透明,、封片或進(jìn)行其它染色a)脫水,、透明、封片:
95%乙醇脫水 2min,。
換用新鮮的 95%乙醇再脫水 2min,。二甲苯透明 5min。
換用新鮮的二甲苯,,再透明 5min,。用中性樹膠或其它封片劑封片。
顯微鏡下觀察,,細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色,。
b)進(jìn)行其它染色:
如果進(jìn)行免疫熒光染色,,或進(jìn)行 Hoechst 等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后:
70%乙醇洗滌 2 次,,每次 2min,。
PBS 或生理鹽水或 TBS 或 TBST 等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡 5min。
進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色,。
1,、如果需要脫水、透明和封片處理,,需自備二甲苯,,中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是 石蠟切片,,需自備 90%乙醇,,無水乙醇以及二甲苯。
2,、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效,。
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