日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

磷酸化蛋白提取試劑盒

操作方法：

1、組織總蛋白的提取

1) 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的磷酸酶抑制劑,、蛋白酶抑制劑和 PMSF,；混勻，放置在冰上 備用,；

2) 稱取 0.1g 的新鮮組織,，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,，然 后加入 0.5-1ml 的新配置的裂解液,，研磨直沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作,；

3) 將組織勻漿液移入 1.5ml 的 EP 管中,，4 ℃ 12000g 離心 30min,；

4) 吸取上清新的管中；

5) 進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗,。 （提取好的蛋白建議保存于-80℃,，即用即取，避免反復凍融,，避免長時間儲存,。）

2、細胞總蛋白的提取

1) 裂解液的用量：107個細胞需要裂解液 1ml,；

2) 貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基,，用冷的 PBS 洗兩次，棄去 PBS,，然后加入計算好的細胞裂解液,；在冰 上用細胞刮刀進行刮離細胞，將刮離的細胞裂解液移入 EP 管中,，顛倒裂解 20-30min,。

3) 懸浮細胞：4℃ 400g 離心收集細胞，用冷的 PBS 洗兩次細胞,，同樣按細胞數(shù)加入裂解液,，渦旋 10s，放置冰上裂解 10min,，重復 3-4 次,；

4) 裂解完畢之后，將細胞裂解液 4 ℃12000g 離心 30min,；

5) 將上清移入新的 EP 管中,；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。 （提取好的蛋白建議保存于-80℃,，即用即取,，避免反復凍融，避免長時間儲存,。）

注意事項：

1. 實驗過程,，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境,。

2. PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加,，因為 PMSF 在水溶液中會快速降解。

相關(guān)文獻：

《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影響因子:3.361 PMID:30502652
《β?elemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang, Lei Chen ,Jin Geng, Limin Liu, Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:30664207
 

磷酸化蛋白提取試劑盒