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兔SP檢測試劑盒

貨號：SP0021

規(guī)格：3ml/6ml/18ml

    本試劑盒適合于一抗為小鼠/兔 IgG 的免疫組化實驗 DAB 顯色。

    SP 試劑盒是專為免疫組化和其他免疫檢測而設(shè)計的,，用以顯示組織和細胞中抗原分布,。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，同親和素一樣,，對生物素有的親和力,，親和素是一個堿性蛋白質(zhì)（PI=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì),。鏈霉親和素等電點接近中性,，對組織和細胞的非特異吸附很低，因此基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低,。

操作步驟:（以石蠟切片為例）
1. 切片常規(guī)脫蠟水(三次二甲苯,，三次乙醇)。
2. 3% H2O2 室溫處理 5-10 分鐘以滅活內(nèi)源性酶,。蒸餾水洗 3 次,。
3.可選步聚：
a、熱修復(fù)抗原,，將切片浸入 0.01M 檸檬酸鈉緩沖液（PH6.0）,，電爐或微波爐加熱沸騰后斷電，間隔 5-10 分鐘后,，反復(fù) 1-2 次,。冷卻后 PBS（pH7.2-7.6）洗滌 1-2 次。
b,、酶消化,，滴加消化液，37℃10 分鐘,，PBS（pH7.2-7.4）洗滌 2-3 次,。
c、跳過此步,，直接進入下一步,。
4. 滴加封閉液，室溫 20 分鐘,。甩去多余液體,，免洗。
5. 用稀釋液將一抗按一定比例稀釋（稀釋后的一抗 4℃可保存一周）,，也可另行購買抗體稀釋液,。滴加稀釋的一抗 37℃ 孵育 1 小時左右或 20℃ 2 小時左右,，也可 4℃過夜。PBS（pH7.2-7.4）洗滌 3次,，每次 2 分鐘,。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強度,、背景有直接關(guān)系,。一般來說，陽性染色強度不夠時,，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間,；背景過高時，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間,。）
6． 根據(jù)用量,，用稀釋液將 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ulBio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液混勻，此工作液 4℃可保存一周),。滴加 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 工作液,，20-37℃ 孵育 30 分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗滌 3 次,，每次 2 分鐘,。
7．根據(jù)使用量,，用稀釋液將鏈酶親和素-POD 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ul鏈酶親和素-POD 濃縮液混勻,，此工作液 4℃可保存一周)。滴加鏈酶親和素-POD 工作液,，20-37℃,，30 分鐘。PBS （pH7.2-7.4）洗滌 4 次,，每次 5 分鐘,。
8．DAB 顯色：根據(jù)用量，用 PBS（pH7.2-7.4）配制,，按 1ml PBS 加入 50ul 20×DAB 顯色液 A,，加入 50ul 20×DAB 顯色液 B 。充分混勻后滴加到切片上,。室溫顯色,，鏡下控制反應(yīng)時間，一般在 5-30分鐘之間,。蒸餾水洗滌終止反應(yīng),。
9．蘇木素輕度復(fù)染。脫水,，透明,，封片。顯微鏡觀察。對于細胞爬片,，固定后,，PBS 漂洗兩次，再用 0.5% Triton X-100 室溫孵育 20 分鐘,，PBS 漂洗兩次,，3% H2O2 處理 15 分鐘；PBS 漂洗兩次,，接上述第 4 步,。對于冰凍切片，固定后,，PBS 漂洗兩次,，接上述第二步。
 

注意事項：
如果染色背景過高,，在 SP 反應(yīng)之后,，DAB 顯色之前，用加有 0.01—0.02% TWEEN-20 的 PBST（pH7.2-7.4）洗滌切片 4 次,，PBS 洗 2 次,，然后 DAB 顯色。
 

相關(guān)產(chǎn)品：
A1800 抗體稀釋液（普通型）
A1810 一抗稀釋液
A1820 HRP 標記抗體稀釋液
P1110 4％多聚甲醛
P2100 10×多聚賴氨酸
T8200 Triton X-100
P1032 20×PBS PH7.2-7.4
P1031 1×PBST PH7.2-7.4 0.01M
C1010 檸檬酸鈉緩沖液 0.01mol/L pH6.0
X1020 0.1%胰蛋白酶液消化液
G1080 Mayer'蘇木素染液(免疫組化)

兔SP檢測試劑盒訂購說明：

1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2,、部分非常用產(chǎn)品,，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。 
3,、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,，若有變動以訂貨當日新價格為準,。 
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5,、請辦理完貨款后,，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真,、、短信,、等形式通知我們,。

運輸說明：

極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,，再用泡沫盒密封,，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子,，然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,，為您的實驗保駕護航,。
低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,，再使用泡沫盒密封,，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周）,，然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,，為您的實驗保駕護航,。
常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,，準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中,。