目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細胞相關(guān)產(chǎn)品>>細胞培養(yǎng)試劑>> E1171細胞培養(yǎng)試劑 EDTA脫鈣液 (PH7.2)
貨號 :E1171
規(guī)格 :100ml/500ml
保存 :常溫保存,,有效期 1 年,。
產(chǎn)品簡介 :
一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時,,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,,較難切除完整的切片,。對含鈣組織好固定之后,再進行脫鈣或二者同時進行,。然后進行下游的實驗,,如脫水、透明,、浸蠟,、包埋、切片,。用于脫鈣的試劑很多,,脫鈣劑包括有機酸、無機酸,、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣,。
EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑,,對組織結(jié)構(gòu)影響小,可以較好的保存組織的某些酶類,, 經(jīng) EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色,。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周數(shù)月,。
Solarbio EDTA 脫鈣液優(yōu)點:①經(jīng) EDTA 脫鈣的組織染色結(jié)果好,;②對組織的結(jié)構(gòu)損害小,;③用化學(xué)方法測試可以確定脫鈣的終點,。
Solarbio EDTA 脫鈣液缺點:①脫鈣速度很慢,不適合常規(guī)標本脫鈣使用,;②脫鈣后組織會稍微變硬,。
操作步驟 :
1,骨組織脫鈣時,,取材不易過厚,,一般大約 5mm。
2,,組織固定后,,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min,。
3,,組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min,。
4,,組織轉(zhuǎn)移 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長時間,。如果想加快脫鈣速度,,可以置于 37℃進行脫鈣。如果必要,,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,,多數(shù)組織脫鈣 2 周~3 個月即可,每周更換一次,,直終點,。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù) 3~5min,,中間間隔 3~5min。
5,,用蒸餾水沖洗數(shù)次,。
6,,常規(guī)脫水、包埋,。
注意事項 :
1,厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可,。
2,,適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過 37~40℃,,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,,尤其不可大于 60℃。
3,,脫鈣應(yīng)*,,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,,以免脫鈣過長引起組織損害,。
4,脫鈣用具避免使用金屬容器,,盡量使用玻璃容器,。
5,骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,,不應(yīng)先脫鈣后固定,,以便減少組織的損傷程度。
6,,每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,,影響染色結(jié)果,。
7,為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
附錄 :
脫鈣終點的測定(物理法):采用針刺、手掐,、鉗夾等方法,,當(dāng)骨組織變軟或針刺時沒有阻力感即可終止
脫鈣。物理檢測法會對組織結(jié)構(gòu)有一定的損害,, 盡量避免用力過大或反復(fù)檢測,。
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