日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

果糖-1,6-二磷酸（FDP）含量檢測(cè)試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC2240
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取一支加入0.5 mL蒸餾水，充分溶解后待用,，用不完的試劑-20℃分裝保存4周,，避免反復(fù)凍融；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入1176μL 蒸餾水充分溶解,，配制成50μmol/mL果糖-1,6-二磷酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,，2-8℃可以保存4周。

產(chǎn)品說明：
果糖1,6-二磷酸（fructose-1,6-diphosphate, FDP）是糖酵解過程中的一種重要的中間產(chǎn)物,，對(duì)多種酶具有調(diào)節(jié)作用,，具有改善細(xì)胞能量代謝,、增加能量利用、抗心律失常及抗組織過氧化等作用,，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥,。
醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸裂解，產(chǎn)物與2,4-二* 苯 肼在酸性介質(zhì)中反應(yīng)生成2,4-二*苯腙,，在堿性溶液中呈紅棕色,，在540 nm處有特征吸收峰。


注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、低溫臺(tái)式離心機(jī),、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍,、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀,、冰、蒸餾水和EP管,。
操作步驟：
一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

組織：按照質(zhì)量（g）：提取液一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g,，加入1mL提取液一）加入提取液一,，冰浴勻漿后于4℃，12000g離心10min,，取0.8mL上清液，再緩慢加入0.15mL提取液二,，緩慢吹打混勻至無氣泡產(chǎn)生,，4℃ 12000g離心10min后取上清待測(cè)。
細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液一）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w,，超聲3秒，間隔7秒,，總時(shí)間3min）,；于4℃，12000g離心10min,，取0.8mL上清液,，再緩慢加入0.15mL提取液二，緩慢吹打混勻至無氣泡產(chǎn)生,，4℃ 12000g離心10min后取上清待測(cè),。
血清（漿）等液體：取100μL液體加入1mL提取液一,，4℃ 12000g離心10min，取0.8mL上清液,，再緩慢加入0.15mL提取液二,，緩慢吹打混勻至無氣泡產(chǎn)生，4℃ 12000g離心10min后取上清待測(cè),。
注：提取液二需緩慢加入,，加入后會(huì)產(chǎn)生大量氣泡，建議使用2mL EP管進(jìn)行操作,。
二,、測(cè)定步驟

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2. 將50µmol/mL的果糖-1,6-二磷酸標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水倍比稀釋為1.5625、0.78125,、0.39,、0.2、0.1 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用,。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表：

實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需100µL標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

1. 樣本測(cè)定：(在1.5 mL離心管中操作）

三、FDA含量計(jì)算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,，其對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y= kx+b,，將ΔA帶入方程得到x（µmol/mL）,。

1. FDP含量的計(jì)算：

（1）按樣本質(zhì)量計(jì)算
FDP含量（µg/g 質(zhì)量）=x×(V上清+V提取液二)×M÷(W×V上清÷V提取液一)=403.75x÷W
（2）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
FDP含量（µg/10⁴ cell）=x×(V上清+V提取液二)×M÷(V上清÷V提取液一×N)=403.75x÷N
（3）按液體體積計(jì)算
FDP含量（µg/mL）=x×（V上清+V提取液二）×M÷ [V液體×V上清÷（V提取液一+V液體）]=4441.25x
V上清：提取時(shí)上清液體積，0.8mL,；V提取液二：提取液二的體積,，0.15mL；V提取液一：提取液一的體積，1mL,；W：樣本質(zhì)量,，g；M：果糖-1,6-二磷酸分子質(zhì)量,，340,；V液體：液體樣本體積，0.1mL,；N：細(xì)胞數(shù)量,，以萬計(jì)。
注意事項(xiàng)：
當(dāng)ΔA測(cè)定大于0.5時(shí),，建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,，計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2270/BC2275  果糖-1,6-二磷酸醛縮酶（FBA）活性檢測(cè)試劑盒
BC2250/BC2255  3-磷酸甘油酸激酶（PGK）活性檢測(cè)試劑

果糖-1,6-二磷酸含量檢測(cè)試劑盒 糖酵解 果糖-1,6-二磷酸含量檢測(cè)試劑盒 糖酵解