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基因工程試劑 DH5α感受態(tài)細(xì)胞
貨 號(hào)：C1100
規(guī) 格：10×100ul / 20×100ul
保 存：-70℃保存,，運(yùn)輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存少一年,，-70℃保存少6個(gè)月,。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
    本公司生產(chǎn)的DH5α感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝制備得到，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化,。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),，轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 10 8 ，-70℃保存 3-5 個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變,。
    基因型: supE44△lacU169（φ80 lacZ△M15）hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1
特 點(diǎn): 一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株,。其 φ80 lacZ△M15 基因的產(chǎn)物可與 pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn) β 互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。

操作方法：（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）

1,、將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上融化,，以下實(shí)驗(yàn)以 100ul 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2,、向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入需轉(zhuǎn)化的目的 DNA,，注意目的 DNA 的體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,，冰浴放置 30 分鐘,。
3、將離心管置于 42℃水浴中 60-90 秒,，然后快速轉(zhuǎn)移到冰浴中放置 2-3 分鐘,，注意不要搖動(dòng)離心管。
4,、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基,，37℃ 180rpm 振蕩培養(yǎng) 1 小時(shí)。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),，使菌體復(fù)蘇,。
5、取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞涂布含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 平板,，37℃倒置培養(yǎng) 12-16 小時(shí),。涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整，如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,，可取 100ul 左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板,；反之，如轉(zhuǎn)化的 DNA總量較少,，可取 200-300ul 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板,。過多菌液可以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。如果預(yù)計(jì)的克隆較少,，可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液,，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存,，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,，可以將剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事項(xiàng)：

1,、感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-70℃,，不可反復(fù)凍融，否則其轉(zhuǎn)化效率將會(huì)降低,。
2,、實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,，防止其它 DNA 或雜菌的污染，避免為以后的篩選,、鑒定帶來影響,。
3、轉(zhuǎn)化時(shí),，轉(zhuǎn)化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內(nèi)成正比,，但當(dāng)加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時(shí) DNA 體積要小于感受態(tài)細(xì)胞體積的十分之一,。
4,、轉(zhuǎn)化率的計(jì)算：轉(zhuǎn)化率＝產(chǎn)生菌落的總數(shù)/鋪板 DNA 總量。
5,、為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功,，可以保留部分連接產(chǎn)物，以重新轉(zhuǎn)化,，將損失降到低,。

相關(guān)產(chǎn)品：

I1020  IPTG  溶液 (50mg/ml)
A1170 氨芐青霉素儲(chǔ)存液 (100mg/ml)
K1030  Kanamycin (100mg/ml) 卡那霉素
L1015  LB 固體培養(yǎng)基 ( 干粉 )
L1020  SOC 液體培養(yǎng)基 ( 干粉 )
X1010  X-gal(20mg/ml)

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Production of l-alanyl-l-glutamine by immobilized Pichia pastoris GS115 expressing α-amino acid ester acyltransferase》 作者:Yi-Min Li, Jiao-Qi Gao, Xu-Ze Pei, Cong Du, Chao Fan, Wen-Jie Yuan and Feng-Wu Bai 期刊:Microbial Cell Factories 影響因子:4.402 PMID:30711013
 

基因工程試劑 DH5α感受態(tài)細(xì)胞訂購(gòu)說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨,。 
2、部分非常用產(chǎn)品,，需提前1－2日預(yù)訂,，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3,、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期,、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn),。 
4,、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整,，因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,，將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真、,、短信,、等形式通知我們,。

運(yùn)輸說明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒,，放入索萊寶的箱子,，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中,，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2,、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封,，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中,，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,。
3,、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中,。