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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>其它系列>> BC4180-50T/48S莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列

莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列
  • 莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC4180-50T/48S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-04-12 15:01:14瀏覽次數(shù):578評(píng)價(jià)

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/48S
貨號(hào) BC4180 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 莽草酸脫氫酶(SD)活性檢測(cè)
儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Shikimic acid Dehydrogenase(SD) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S


莽草酸脫氫酶(SD活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
貨號(hào): BC4180
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三粉劑×2-20保存
溶液的配制:
  1. 提取液:內(nèi)含不溶物,,用前搖勻,。

  2. 試劑二:臨用前加入10 mL蒸餾水溶解。

  3. 試劑臨用前每瓶加入11 mL蒸餾水溶解,。

  4. 工作液的配制:根據(jù)用量按照試劑一:試劑二:試劑三為7:4:8的體積比例充分混勻,,現(xiàn)用現(xiàn)配,用前25℃預(yù)熱15min,。

產(chǎn)品說(shuō)明:
莽草酸途徑是存在于植物和微生物中的一條重要的代謝途徑,,莽草酸脫氫酶(EC 1.1.1.25) 是莽草酸合成代謝途徑中催化第四步反應(yīng)的關(guān)鍵酶。
莽草酸脫氫酶催化莽草酸和NADP產(chǎn)生NADPH,,檢測(cè)340nm下的吸光值增加速率來(lái)表示SD活性,。
Shikimic Acid +NADP               NADPH(340nm)
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、1mL石英比色皿,、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器,、冰和蒸餾水,。
操作步驟:
一、樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,,具體比例可以參考文獻(xiàn)
1,、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(加入前搖勻))進(jìn)行冰浴勻漿,,然后8000g,,4℃,離心10min,,取上清置于冰上待測(cè),。
2,、細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,,間隔7秒,,總時(shí)間3min);然后8000g,,4℃,,離心10min,取上清置于冰上待測(cè),。
3,、液體:直接檢測(cè)。
二,、測(cè)定步驟具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
  1. 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零,。

  2. 工作液25℃預(yù)熱10min以上,。

  3. 操作表:在1mL石英比色皿中分別加入下列試劑

試劑名稱空白管測(cè)定管
工作液(µL)950950
樣本(µL)-50
蒸餾水(µL)50-
加入樣本即開(kāi)始計(jì)時(shí),充分混勻后于340nm處測(cè)定20s時(shí)的吸光值A15min20s時(shí)的吸光值A2,,計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定,,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次),。

注意事項(xiàng)
  1. 樣本提取上清液置于冰上待測(cè),,且樣本提取完成后建議2h內(nèi)測(cè)完。

  2. 樣本的蛋白濃度需自行測(cè)定,,由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),,所以測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需扣除提取液自身蛋白濃度。

  3. ΔA大于1時(shí),,建議將樣本稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,。當(dāng)ΔA小于0.01時(shí),可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(10min15min)來(lái)測(cè)定,。

  4. 空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔,,正常情況下,變化不超過(guò)0.01,。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
  1. 0.1g蘿卜葉,,加入1mL提取液,,進(jìn)行樣本處理,,取上清按照測(cè)得步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=1.441-1.201=0.24ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.24,,按照樣本質(zhì)量計(jì)算得:SD酶活(U/g 質(zhì)量)=643×ΔA÷W=1543.2 U/g 質(zhì)量。

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC2030/BC2035 異檸檬酸裂解酶(ICL)活性檢測(cè)檢測(cè)試劑盒
BC3170/BC3175 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒

 

 莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列 莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列

 

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