日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

植酸酶活性檢測(cè)試劑盒

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)：BC3140

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前將試劑一加入到緩沖液中（可吸取緩沖液到試劑一瓶中反復(fù)沖洗）,，充分震蕩溶解,，用不完的試劑2-8℃可保存4周。

2. 試劑二：臨用前加入6.3mL蒸餾水充分溶解,，再將槍頭伸入液面下緩慢加入1.7mL濃硫酸,。2-8℃可保存4周。

3. 試劑三：臨用前加入40mL蒸餾水充分溶解,。2-8℃可保存4周,。

4. 工作液：臨用前根據(jù)測(cè)定數(shù)量將試劑二：試劑三=1mL：5mL (約10T)的比例混勻，配制后于2-8℃可保存3天,。

5. 標(biāo)準(zhǔn)品：5μmol/mL無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液,。

產(chǎn)品說(shuō)明：

植酸酶（Phytase）又叫肌醇六磷酸酶，是一種蛋白質(zhì)和糖的結(jié)合酶,，植酸酶可以分解植酸產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷和肌醇,，極大的提高生物對(duì)養(yǎng)分的利用率，天然植酸酶廣泛存在于植物,、動(dòng)物組織和微生物中,，現(xiàn)多用微生物來(lái)合成植酸酶進(jìn)行生產(chǎn)應(yīng)用，植酸酶在糧食生產(chǎn),、畜牧養(yǎng)殖領(lǐng)域具有廣泛的研究?jī)r(jià)值,。

在一定的環(huán)境條件下，植酸酶可以分解植酸鈉（肌醇六磷酸十二鈉）產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷和肌醇衍生物,，在酸性條件下,，無(wú)機(jī)磷和鉬酸銨顯色劑發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)色的鉬藍(lán)物質(zhì),，其在700nm有特征吸收峰,，通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的含量，可計(jì)算出植酸酶的活性,。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì),、低溫離心機(jī),、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀,、濃硫酸,、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水,。

操作步驟：

一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

1. 組織：按照樣本質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為1:5~10 的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織,，加入1mL提取液）加入提取液,，冰浴勻漿；4000g 4℃離心10min（若仍然渾濁,，可延長(zhǎng)離心時(shí)間）,，取上清置冰上待測(cè)。

2. 細(xì)菌或細(xì)胞樣本：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000:1 的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液）加入提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴,，功率200W,，超聲 3s，間隔 7s,，總時(shí)間3min）,，4000g 4℃離心10min，取上清置冰上待測(cè),。

3. 培養(yǎng)液或其他液體：直接檢測(cè),。若溶液渾濁則離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。

二,、測(cè)定步驟

1. 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至700nm，用蒸餾水調(diào)零,。

2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋?zhuān)簩?/span>5μmol/mL無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至2,、1、0.5,、0.25,、0.125、0.0625,、0.03125,、0.0156μmol/mL備用。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋可參考下表：

備注：實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需200µL標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

3,、在EP管中按下表步驟加樣：

常溫反應(yīng)10min，常溫8000g,，離心10min,，吸取1mL上清，于700nm處測(cè)定吸光值,，分別記為A_測(cè)定,、A_對(duì)照、A_{標(biāo)準(zhǔn)},、A_空白,。分別計(jì)算 ΔA=A_測(cè)定-A_對(duì)照，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A_{標(biāo)準(zhǔn)}-A_空白（標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需做 1-2 次,，每個(gè)測(cè)定管需設(shè)置一個(gè)對(duì)照管）,。

二,、植酸酶活性的計(jì)算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（x,，μmol/mL）和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)）,，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA（y,，ΔA）代入公式計(jì)算樣本濃度（x,，μmol/mL）。

2. 植酸酶活性計(jì)算

（1）按樣本蛋白質(zhì)濃度計(jì)算

單位定義：在37℃,，pH5.5環(huán)境下,，每mg組織蛋白每分鐘在反應(yīng)體系釋放1μmol無(wú)機(jī)磷為1個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性（U/mg prot）= x×V樣總÷（Cpr×V樣總）÷T= x÷Cpr÷30

（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算

單位定義：在37℃,，pH5.5環(huán)境下,，每g組織每分鐘在反應(yīng)體系釋放1μmol無(wú)機(jī)磷為1個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性（U/g 質(zhì)量）= x×V樣總÷W÷T = x÷W÷30

（3）按細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

單位定義：在37℃,，pH5.5環(huán)境下,，每10⁴個(gè)細(xì)胞每分鐘在反應(yīng)體系釋放1μmol無(wú)機(jī)磷為1個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性（U/10⁴ cell）=  x×V樣總÷N÷T = x÷N÷30

（4）按照液體樣本體積計(jì)算

單位定義：在37℃,，pH5.5環(huán)境下,，每mL樣本每分鐘在反應(yīng)體系釋放1μmol無(wú)機(jī)磷為1個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性（U/mL）= x×V樣÷V樣÷T=x÷30

V樣：加入樣本體積,，0.2mL,；V樣總：提取液體積，1mL,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量，g,；T：反應(yīng)時(shí)間,，30min；N：細(xì)胞數(shù)量,，以萬(wàn)計(jì),。

注意事項(xiàng)：

1. 為防止沸水浴10min過(guò)程中水分散失，建議使用螺旋口EP管或用封口膜給EP管纏口,。

2. 如果測(cè)定吸光值過(guò)低或接近空白,，適當(dāng)延長(zhǎng)第二步的37℃水浴反應(yīng)時(shí)間或加大樣本量后，重新測(cè)定,。如果A_測(cè)定大于1.5或者ΔA超過(guò)檢測(cè)范圍,，建議將樣本用蒸餾水適當(dāng)稀釋后進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式,。

3. 結(jié)果于40min內(nèi)測(cè)定完畢,。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.15g菠菜種子（已發(fā)芽），按照測(cè)定步驟操作,，測(cè)得計(jì)算A_測(cè)定 = 1.327,，A_對(duì)照 = 1.054，?A= 0.273,，將?A代入標(biāo)曲公式y = 0.4892x + 0.0313,，得出x= 0.49，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

植酸酶活性（U/g 質(zhì)量）= 0.1098 U/g 質(zhì)量,。

參考文獻(xiàn)：

[1] Senna R , Simonin V , Silva-Neto M A C , et al. Induction of acid phosphatase activity during germination of maize (Zea mays) seeds[J]. Plant Physiology & Biochemistry, 2006, 44(7-9):467-473.

[2] Iqbal T H , Lewis K O , Cooper B T . Phytase activity in the human and rat small intestine[J]. Gut, 1994, 35(9):1233-1236.

[3] Azeke M A , Egielewa S J , Ihimire E . Effect of germination on the phytase activity, phytate and total phosphorus contents of rice (Oryza sativa), maize (Zea mays), millet (Panicum miliaceum), sorghum (Sorghum bicolor) and wheat (Triticum aestivum)[J]. Journal of Food Science&Technology, 2011.

相關(guān)系列產(chǎn)品：

BC3610/BC3615  堿性木聚糖酶（BAX）活性檢測(cè)試劑盒

BC2540/BC2545  纖維素酶(CL)活性檢測(cè)試劑盒

BC0360/BC0365  β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測(cè)試劑盒

BC0610/BC0615  α-淀*酶活性檢測(cè)試劑盒

植酸酶活性檢測(cè)試劑盒 其它 植酸酶活性檢測(cè)試劑盒 其它