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omega原裝 膠回收kit 100T/盒
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規(guī)格:100T/盒
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D2500-50T | Omega | 50T | 380.00元 |
E.Z.N.A® Gel Extraction Kit采用硅膠柱純化技術(shù),,適合從各種類型各種濃度的瓊脂糖凝膠中回收100bp-20kb的DNA片段,,回收率可達到60-70%,可直接應用于酶促連接反應,、PCR擴增,、酶切以及標記等實驗。
此外,,該試劑盒還可以用從于PCR產(chǎn)物,,酶切產(chǎn)物中直接純化DNA。將目的DNA片段從瓊脂糖凝膠中切下,,加入Binding Buffe水浴溶解凝膠,,而后轉(zhuǎn)移HiBind®離心柱上離心結(jié)合DNA,經(jīng)兩步簡單洗滌,,終用Elution Buffer洗脫DNA,。
快速--可以在15分鐘內(nèi)完成純化工作
可靠--適的緩沖液保證DNA純度和高回收率
安全--無須接觸有害的有機物抽提
高質(zhì)--純化的DNA適合于各種應用
片段大--可回收大于10kb的DNA片段
膠回收試劑盒操作步驟(omega)
1. 配制瓊脂糖EB凝膠,電泳以分離DNA片段。任何類型或等級的瓊脂糖都可以使用,。
我們強烈的推薦使用新鮮的TAE/TBE電泳緩沖液,。不要重復使用電泳緩沖液,舊的電泳緩沖液PH會增加而降低DNA的回收產(chǎn)量,;
2. 電泳足夠時間后,,在紫外燈下小心地把所需的DNA的片段切下來。并盡量去除多余的凝膠,。
注意:DNA在紫外燈下的曝光的時間不要超過30秒,,同時在紫外燈下操作的時候一定要戴保護眼鏡。
3. 稱取空離心管的重量,,切下帶目的片段的凝膠裝在1.5ml離心管中并稱其重量,,求出凝膠塊的重量,近似地確定其體積,。一般情況下,,凝膠的密度為1g/ml,于是凝膠的體積與重量的關(guān)系可按下面換算:凝膠薄片的重量為0.2g 則其體積為0.2ml,;加入等倍凝膠體積的Binding Buffer,,把混合物置于55℃~65℃水浴中溫浴7min凝膠*融化,,其間每隔2-3分鐘混勻一次;
重要提醒:在凝膠*溶解之后,,注意凝膠-Binding Buffer混合物的pH值,。如果其pH值大于8的話,DNA的產(chǎn)量將大大減少,。觀察混合物的顏色,,如果是橙色或紅色,則要加入5μl 濃度為5 M,,pH為5.2的醋酸鈉,,以調(diào)低其pH值。經(jīng)過這一調(diào)節(jié),,該混合物的顏色將恢復為正常的淺黃色,。一般情況下,使用新鮮的電泳緩沖液,,凝膠-Binding buffer混合物的PH值的不會升高,;
4. 轉(zhuǎn)移700μl的DNA-瓊脂糖溶液到一個HiBindTM DNA柱子,并把柱子裝在一個干凈的2ml收集管內(nèi),,室溫下,,10,000×g離心1min,棄去液體,。
一個HiBind DNA柱子多可容納700μl的溶液,,如果DNA-瓊脂糖混合物的體積大于700μl,可先轉(zhuǎn)移700μl溶液柱子,,離心完后,,將余下的溶液繼續(xù)加上柱子上。但是每一個HiBindTM柱子多可以結(jié)合25~30μg DNA,。如果預期產(chǎn)量較大,,則把樣品分別加到合適數(shù)目的柱中。
5. 將柱子重新套回收集管中,,加300μl Binding BufferHiBind DNA 柱子中,;室溫下,10,000×g離心 1分鐘,,去棄濾出液,;這一步相當關(guān)鍵,,不要忽略此步,。
6. 將柱子重新套回收集管中,加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,,室溫下,,10,000×g離心1分鐘,,去棄濾出液;注:SPW Wash buffer在使用前必須按瓶子標鑒要求用無水乙醇進行稀釋,。
7. 將柱子重新套回收集管中,,重復加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室溫下,,10,000×g離心1分鐘,,去棄濾出液;
8. 棄去液體,,將空柱子重新套回收集管中,,10,000×g離心1min以甩干柱基質(zhì)殘余的液體。
這步可以去除柱子基質(zhì)上殘余的乙醇,,不要省略此步―――對得到好的DNA產(chǎn)量是十分重要的,。
9. 把柱子裝在一個干凈的1.5ml離心管上,加入30~50μl洗脫液或滅菌水上柱子膜上,,10,000×g離心1分鐘,,離心管中的溶液就是純化的DNA產(chǎn)物,保存于-20度,。
如果再洗脫一次的話可以把殘余的DNA洗脫出來,,不過那樣的濃度就會較低。
DNA的產(chǎn)量及質(zhì)量:
把純化產(chǎn)物的樣品稀釋一定的倍數(shù)后,,分別在260nm和280nm下測其光吸收值,,回收得到的DNA的濃度可按以下公式來計算: DNA濃度=光吸收260×50×稀釋倍數(shù)μg/ml
長度大于500bp的片段通常能純化得到80%的產(chǎn)量。 而50bp~500bp的帶則可達到55%~80%的回收率,。(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸純度的一個標記,。如果此值1.8,則意味著核酸的純度>90%,。另一方面,,如果純化產(chǎn)物的產(chǎn)量較低時,可以用瓊脂糖EB電泳估算產(chǎn)物的濃度,。
omega原裝 膠回收kit 100T/盒訂購說明:
1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨,。
2,、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預訂,,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3,、部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,,若有變動以訂貨當日新價格為準,。
4、每日訂單截止時間為16點整,,部分城市可到17點整,,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5,、請辦理完貨款后,,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真、,、短信,、等形式通知我們。
運輸說明:
1,、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,,膠帶層層粘住泡沫盒,,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航,。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,,再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實驗保駕護航,。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝,。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。