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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>線粒體呼吸鏈系列>> 線粒體呼吸鏈系列試劑盒 AMP含量試劑盒

線粒體呼吸鏈系列試劑盒 AMP含量試劑盒
  • 線粒體呼吸鏈系列試劑盒 AMP含量試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
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  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-07-29 12:52:59瀏覽次數(shù):1442評價

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線粒體呼吸鏈系列試劑盒 AMP含量試劑盒
AMP 廣泛存在于動物、 植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,, 是描述細胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù),。 測定 AMP含量并且計算能荷,,能夠反映能量代謝狀態(tài),。
AMP 在 254 nm 下有吸收峰,,可以利用高效液相色譜法測定其含量,。

線粒體呼吸鏈系列試劑盒 AMP含量試劑盒


產(chǎn)品簡介 :
    AMP 廣泛存在于動物,、 植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,, 是描述細胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù),。 測定 AMP含量并且計算能荷,,能夠反映能量代謝狀態(tài)。
    AMP 在 254 nm 下有吸收峰,,可以利用高效液相色譜法測定其含量,。


試驗中所需的儀器和試劑:
    高效液相色譜儀、低速離心機,、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器(水系,,50 個,,0.22µm) 、濾膜(水系和有機系各 1 個,,0.45µm) ,、C18 柱(4.6 ×150 mm) 、可調(diào)式移液器,、樣品瓶(50 個,,2mL) 、甲醇(色譜級,,300 mL) ,、甲醇(色譜級,300 mL) ,、蒸餾水


產(chǎn)品內(nèi)容
     試劑一:液體 60mL×1 瓶,,4℃保存,;
     試劑二:液體 60mL×1 瓶,,4℃保存;
     試劑三: 粉劑 1×1 瓶, 粉劑 2×1 瓶,, 4℃保存,; 臨用前用少量蒸餾水將粉劑 1 和粉劑 2 溶解后倒入 1000mL容量瓶中,用蒸餾水定容 1000mL,,形成流動相緩沖液基質(zhì)(注:試劑瓶中的粉劑要沖洗干凈), 4℃可保存 1 周,;
     試劑四: AMP 標準品 5mg×1 支, -20℃保存,。 臨用前加入 1mL 雙蒸水,, 配成 5mg/mL 溶液, 配好后-20℃可保存 1 周,;


操作步驟 :
一 ,、 實驗前的準備工作 :
     1,、將雙蒸水 1000 mL,、流動相緩沖液基質(zhì) 1000 mL 和甲醇 300 mL 用 0.45 µm 的濾膜抽濾,,以除去溶劑中的雜質(zhì),,防止堵塞色譜柱,。(注:雙蒸水和緩沖液基質(zhì)用水系濾膜抽濾,,甲醇用有機系濾膜抽濾)。
     2,、 流動相的配制: 將抽濾完畢的流動相緩沖液基質(zhì) 1000 mL 與甲醇配比為 99.9: 0.1 (v/v) ,, 即取 999mL緩沖液基質(zhì)與 1mL 甲醇混合。
     3,、將抽濾完畢的甲醇和雙蒸水配比成 100%的甲醇,, 10%的甲醇,雙蒸水各 250 mL,。 將 2 和 3 中的溶劑超聲 30 分鐘,以脫去溶劑中的氣泡,,防止堵塞色譜柱,。


二 、AMP  的提取 :
     1,、組織的處理:準確稱取組織重量 0.1g,,加入 1mL 試劑一,提取 AMP,, 4000 g 常溫離心 15 min,,取上清液,加入等體積的試劑二,,混勻,,4000 g 常溫離心 15 min,取上清,,0.22µm 水系微孔濾膜過濾后冰上放置,,待測。

     2,、 細胞處理: 收集約 30 mL 細胞,, 離心菌體經(jīng)干燥后, 加入 1 mL 試劑一, 超聲破壁細胞(950 W,, 30%,,15 min,工作 1 s 間隔 2 s),,4000 g 常溫離心 15 min,,取上清液,加入等體積的試劑二,,混勻,,4000 g 常溫離心 15 min,取上清,,0.22µm 水系微孔濾膜過濾后冰上放置,,待測。


三 ,、AMP  含量測定操作步驟 :
     1. 開啟電腦,、檢測器和泵,安裝上色譜柱,,打開 empower 軟件,,在方法組中設置進樣量 20 µL,流速 1mL/min,,保留時間 10min,,檢測波長 254nm,設置完畢保存方法組。
     2. 用 100%的甲醇,、10%的甲醇,、雙蒸水按甲醇濃度從大到小的順序洗色譜柱 30min。
     3. 用流動相洗柱子,,待基線穩(wěn)定后開始加樣,。
     4. 加入標準品 20 µL,在 10min 內(nèi)可分離 AMP,,AMP 的保留時間在 7min 左右(柱子不同,,保留時間有差異),計算不同濃度的 AMP 標準品的峰面積,。
     5. 加入樣品 20 µL,,在相應保留時間處檢測 AMP 的峰面積。
        AMP  含量的計算 :將 5mg/ml 的 AMP 標準品用雙蒸水分別稀釋成 100 µg/ml,、80 µg/ml、60 µg /ml,、40 µg /ml 和 20 µg /ml的 AMP 標準品溶液,,以標準品濃度(µg/ml)為橫坐標,峰面積為縱坐標分別計算 AMP 標準曲線。
        注:標準品的稀釋倍數(shù)要根據(jù)樣品中 AMP 濃度確定,,樣品中 AMP 的峰面積必須落在不同濃度的 AMP 標準品的峰面積之內(nèi),,該標準品稀釋倍數(shù)只是一個參考。

 

線粒體呼吸鏈系列試劑盒 AMP含量試劑盒訂購說明:

1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2,、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂,。 
3,、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,,若有變動以訂貨當日新價格為準,。 
4、每日訂單截止時間為16點整,,部分城市可到17點整,,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5,、請辦理完貨款后,,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真、,、短信,、等形式通知我們。


運輸說明:

1,、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,,膠帶層層粘住泡沫盒,,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航,。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴實密封泡沫盒,,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航,。
3,、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中,。

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