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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25mg |
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貨號 | B8030 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 熒光色素;用于DNA,、染色體和核酸的染色,;熒光染色法和免疫熒光技術(shù),。 |
赫斯特熒光染料33258(染色劑)
有效期 | 3年 |
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英文名稱 | Hoechst 33258 |
CAS | 23491-45-4 |
分子式 | C25H24N6O·3HCl |
分子量 | 533.88 |
儲存條件 | −20℃ |
純度 | Purity≥98%(TLC) |
外觀(性狀) | 黃色或綠色粉末 |
單位 | 支 |
別名:2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2- (4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258; Hoechst 33258
說明:熒光色素,;用于DNA,、染色體和核酸的染色,;熒光染色法和免疫熒光技術(shù)。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,,它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光,,對細胞的毒性較低,。Hoechst 33258 常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,,也可以用于普通的細胞核染色,,或常規(guī)的DNA染色,。
物理性狀:黃色深黃色粉末;溶于水,,黃或棕色溶液,參考濃度為9.80 - 10.20 mg/ml,;熔點>300℃,。
用途:細胞遺傳學研究的常用試劑,熒光染色細胞的DNA ,,插入DNA的A-T區(qū),,具有低的細胞毒性,形成膜滲透性熒光DNA鏈,。
用于細胞核染色時,,推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml,。
配制母液
Hoechst 33258溶于水,,溶解度可達10mg/ml,。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
注意事項
1) Hoechst 33258 對人體有一定刺激性,,請注意適當防護,。
2) 熒光染料都存在淬滅的問題,,建議染色后盡量當天完成檢測。
3) 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4) 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
使用方法
1. 用PBS或合適的緩沖液制備10~50µM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的細胞或組織染色:
對于固定的細胞或組織樣品,,固定后,,適當洗滌去除固定劑,。隨后如果需要進行免疫熒光染色,,則行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst33258染色,。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色,。
a) 對于貼壁細胞或組織切片:加入適量Hoechst 33258染色液,,覆蓋住樣品即可,。對于懸浮細胞:少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘,。
b) 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
c) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350nm,發(fā)射波長460nm,。
3. 活細胞或組織染色:
a) 細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液,約1/10細胞培養(yǎng)基體積,,必須充分覆蓋住待染色的樣品,。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100μl染色液,。
b) 在 37℃培養(yǎng)細胞 10~20 分鐘,。
c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察,。激發(fā)波長350nm,,發(fā)射波長460nm。
相關(guān)文獻:
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赫斯特熒光染料33258(染色劑)