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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒
貨號:D2400
規(guī)格:50T,、100T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期 12 個月,,2℃-8℃保存時間更長 ,。
產(chǎn)品說明:
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清,、淋巴液中提取 DNA 病毒基因組,,不適合于 RNA 病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可用于各種常規(guī)操作,,包括酶切,、PCR、文庫構(gòu)建,、Southern 雜交等實驗,。
產(chǎn)品包裝:
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽,。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心,。
1、 取病毒上清液 0.5ml,,12000rpm 離心 5min,,盡量吸盡上清使用,棄去沉淀,。
2,、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K, 充分混勻,, 65℃消化 10-20min,, 期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3,、 向管中加入 500ul 結(jié)合液,,充分混勻。再向管中加入 400ul 無水乙醇,,充分混勻,,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA 的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,,靜置 2min,。 (吸附柱的大容積為 750ul,可分兩次加入,。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心,。 )
4、 12000rpm 離心 2min,,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中。
5,、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),,12000rpm 離心 1min,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中,。
6、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,,12000rpm 離心 1min,,棄廢液,將吸附柱放入收集管中,。
7,、 12000rpm 離心 2min,將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等,。
8,、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,,室溫放置 5min,,12000rpm 離心 1min。
9,、 離心所得洗脫液再加入吸附柱中,, 室溫放置 2min, 12000rpm 離心 2min,, 即可得到高質(zhì)量的病毒基因組 DNA,。
注意事項:
1、試劑盒拆封后,,蛋白酶K需放置-20℃保存,。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降,。
3,、若結(jié)合液中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解再使用,,不影響效果,。
4,、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,,體積過小會影響回收效率。洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍),,pH 值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,,以防DNA降解,。
5、DNA濃度及純度檢測:得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關(guān),。D 260 值為 1.0 相當(dāng)于大約 50 ug/ml雙鏈DNA,、40 ug/ml單鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值應(yīng)為 1.7-1.9,,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,,而使用去離子水,比值會偏低,,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,,但并不表示純度低。
6,、如果病毒含量過低,,后提取的基因組DAN電泳可能無法檢測到,但PCR等其他實驗還會有結(jié)果,。
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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒訂購說明:
1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨,。
2,、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時間為16點整,,部分城市可到17點整,,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5,、請辦理完貨款后,,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真、,、短信,、等形式通知我們。
運(yùn)輸說明:
1,、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,,膠帶層層粘住泡沫盒,,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航,。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,,再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實驗保駕護(hù)航,。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝,。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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