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小鼠 HYD ELISA檢測試劑盒使用說明書

試驗原理：
HYD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知HYD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測,。先將HYD和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中HYD的濃度呈比例關(guān)系,。

內(nèi)容及其配制：
試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T）
塑料膜板蓋 1塊 半塊
標(biāo)準(zhǔn)品：240ng/ml 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
空白對照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
生物素標(biāo)記的抗HYD抗體 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
親和鏈酶素-HRP 1瓶（12ml） 1瓶（5ml）
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）

自備材料：
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200ul、500ul,、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
4.

樣品收集,、處理及保存方法：

1,、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原
和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血紅

細胞迅速小心地分離。
2,、 血漿……EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液,。
5、 保存……如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

操作注意事項：

● 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存。
● 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì),。
● 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
● 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
● 加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
● 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。

安全性：

1. 避免直接接觸終止液和底物A,、B，一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗,。
2. 實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。