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　　二維梯度PCR其實(shí)就是將多個(gè)的PCR反應(yīng)放在一起做，不用一次一次的作很多次,，溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度,，或者說可以在適合的退火溫度下擴(kuò)增出目的條帶。除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外,，其梯度模塊還能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)12個(gè)不同退火溫度的PCR反應(yīng),，在梯度模塊上，可實(shí)現(xiàn)對(duì)梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整,，自由編程12道溫度,，梯度實(shí)現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時(shí)進(jìn)行熱循環(huán),。僅一次實(shí)驗(yàn)就能確定特定體系相應(yīng)的退火溫度。從而可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,，大大提高PCR科研效率,。
 

　　二維梯度PCR實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)：
 

　　1.戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液,，立即更換手套,；
 

　　2.使用一次性吸頭，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,，吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,，避免氣溶膠的污染；
 

　　3.避免反應(yīng)液飛濺,，打開反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,，開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面,；
 

　　4.操作多份樣品時(shí)，制備反應(yīng)混合液,，先將dNTP,、緩沖液、引物和酶混合好,，然后分裝,，這樣即可以減少操作，避免污染,，又可以增加反應(yīng)的準(zhǔn)確度,；
 

　　5.加入反應(yīng)模板，加入后蓋緊反應(yīng)管,；
 

　　6.操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照,，即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性，又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性,；
 

　　7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,，由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染，建議使用可替換或高壓處理的加樣器,。如沒有這種特殊的加樣器,，至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該專用，不能交叉使用,，尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū),；
 

　　8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證結(jié)果,，慎下結(jié)論,。
 

　　二維梯度PCR應(yīng)用領(lǐng)域：分子生物學(xué),、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè),、司法科學(xué)、生物技術(shù),、環(huán)境科學(xué),、微生物學(xué)、臨床診斷,、流行病學(xué),、遺傳學(xué)、基因芯片,、基因檢測(cè),、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Picymerase Chain Reaction,，PCR)為特征的,、以檢測(cè)DNA/RNA為目的的各種病原體檢測(cè)及基因分析。